弓形虫ME49虫株α-微管蛋白对神经瘤母细胞自噬的影响

• 作者: 刘棠慧 孟婷婷 李贵峰 杨子鹏 王俊杰 袁子国 谭杰兴
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 刚地弓形虫 α-微管蛋白 神经瘤母细胞 自噬
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 715-722
• 页数: 8页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0096

摘要

为研究刚地弓形虫α-微管蛋白(TgTUBA1)与神经瘤母细胞(N2a)自噬的关系,利用TgTUBA1基因的CDS序列设计引物并引入HA标签序列,提取弓形虫ME49虫株总RNA并反转录获得cDNA,以cDNA为模板进行PCR扩增,获得目的片段,并克隆至pcDNA3.1(+)载体上.将构建的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HA-TUBA1转染至N2a细胞内,通过透射电子显微镜和荧光显微镜观察自噬小体,并通过Western-blot检测LC3 Ⅰ/Ⅱ的表达变化.结果 显示,成功构建了pcDNA3.1(+)-HA-TUBA1真核表达载体,Western-blot试验检测到50 ku大小的特异目的条带.与空载体组相比,pcDNA3.1(+)-HA-TUBA1转染N2a细胞48 h后,N2a细胞皱缩、突触减少;观察到特征性的自噬小体;自噬相关蛋白LC3 Ⅰ/Ⅱ表达上调.本研究证明了TgTUBA1蛋白可以促进N2a细胞自噬现象的发生,这为宿主细胞抗弓形虫感染提供了新的研究思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁子国		37	84	7.0	8.0
2	李贵峰		2	0	0.0	0.0
3	孟婷婷		2	0	0.0	0.0
4	杨子鹏		2	0	0.0	0.0
5	王俊杰		1	0	0.0	0.0
6	刘棠慧		1	0	0.0	0.0
7	谭杰兴		1	0	0.0	0.0