辽宁省部分地区对鳞翅目害虫高毒力的苏云金芽胞杆菌菌株的分离与筛选

• 作者: 倪鹤嘉 孙敬 李海涛 王静 程雪 谭佳丽 高泽平 高继国 魏盼盼
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苏云金芽胞杆菌(Bt) 限制性片段长度多态性PCR方法(PCR-RFLP) 鳞翅目害虫 cry基因
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 1513-1520
• 页数: 8页
• 分类号: S436.3
• 字数: 4575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.08.019

摘要

鳞翅目害虫每年对农业生产造成巨大损失,化学农药的长期施用对生态环境造成严重破坏.苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)以其杀虫活性高,对环境友好等优点成为应用最为广泛的微生物杀虫剂.本研究拟对辽宁省苏云金芽胞杆菌的分布和基因多样性进行研究,了解其分布特点,发掘新型Bt资源,筛选出对鳞翅目害虫有高活性的菌株.利用温度筛选法从土壤中分离得到野生Bt菌株,利用限制性片段长度多态性PCR方法(restriction fragment length polymorphism PCR,PCR-RFLP)分析其基因型,利用SDS-PAGE对其杀虫晶体蛋白进行分析,并测定分离菌株对鳞翅目5种害虫的杀虫活性.从辽宁省不同地区收集不同类型的土壤524份,共分离出66株野生Bt菌株,出菌率为12.6％.晶体形状呈现出菱形、球形、短双锥、不规则形等形状.分离株多含有cry1、cry2及cry8基因,表达约130、90和60 kD的蛋白.杀虫毒力检测表明,菌株DD229、DD214-2、YK524和YK540对鳞翅目害虫具有较高活性.辽宁省地区苏云金芽胞杆菌分布广泛、资源丰富,获得4株对鳞翅目害虫杀虫活性较高菌株,具有良好的研究和应用价值.