鲤lipea基因表达的时空特征及与脂肪沉积相关性分析

• 作者: 党红阳 匡友谊 吕伟华 孙志鹏 孙效文 曹顶臣 郑先虎
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤 激素敏感性脂肪酶 基因克隆 基因表达 脂肪沉积
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 251-260
• 页数: 10页
• 分类号: S965
• 字数: 6387字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2019.18187

摘要

本文旨在克隆鲤(Cyprinus carpio)激素敏感性脂肪酶a(hormone-sensitive lipase a,lipea)基因,探究其时空表达特征及其与脂肪沉积的关系,以期为鲤脂肪沉积分子调控机制研究奠定理论基础.本实验采用RACE技术克隆获得鲤lipea基因,其cDNA全长为3379 bp,包括230 bp的5′非翻译区(5′-UTR)、1067 bp的3′非翻译区(3′-UTR)和编码693个氨基酸的开放阅读框.多序列比对显示,鲤lipea与斑马鱼(Danio rerio)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)的氨基酸序列相似性分别为88.17％、64.94％和63.35％,不同物种间序列差异主要集中在C-端的多肽序列上.蛋白质结构分析显示该蛋白含有3个功能域分别具有脂肪酶活性、乙酰基水解酶活性和水解酶活性.应用实时荧光定量PCR技术分析了lipea基因在鲤各组织、不同发育时期以及脂肪含量极端差异个体的肌肉和脂肪组织中mRNA表达量的变化.结果显示,lipea在各组织中均有表达,腹腔脂肪中相对表达量最高,其次是腹部肌肉,血液中最少.随着胚胎的发育,lipea的表达水平呈现下降趋势,8细胞期表达量最高,其次是囊胚晚期,开口期最少.lipea表达量与背部肌肉脂肪含量呈正相关,但差异不显著(P>0.05),与腹腔脂肪量呈负相关,且差异极显著性(P<0.01),推测lipea基因对鲤腹腔脂肪沉积可能具有抑制作用.本实验结果可为进一步解析鲤lipea基因的功能和基因调控脂肪沉积分子机制研究提供参考.