不同浓度miR-155mimics和miR-155 inihibitor在足细胞中的转染效果

• 作者: 凌霄雁 古贤君 杜秀日 林栩 梁钊 覃卿 郑心彤
• 来源期刊: 右江医学
• 学科: 医学
• 关键词: 足细胞 miR-155mimics miR-155inihibitor LipofectamineTM2000
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 论著?基础研究
• 页码范围: 886-891
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2+6
• 字数: 3188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-1383.2019.12.002

摘要

目的 探讨瞬时转染miR-155mimics和miR-155 inihibitor化学合成物在足细胞中表达变化及其稳定情况.方法 体外培养小鼠肾小球足细胞,用脂质体法将miR-155mimics∕NC、miR-155 inihibitor∕NC、Cy3 miR-155 mimics∕inhibi-tor NC转染足细胞,构建足细胞内miR-155高表达模型、低表达模型、荧光基团.然后用免疫荧光显微镜观察不同剂量LipofectamineTM 2000转染不同浓度Cy3 miR-155 NC后的荧光转染效果.用实时荧光定量PCR技术检测足细胞中miR-155mimics浓度梯度(50、80、100 nmol∕mL)、miR-155 inihibitor浓度梯度(80、100、150 nmol∕mL)的miRNA-155表达.结果 达到一定剂量的LipofectamineTM 2000足以饱和不同浓度的miRNA,并将不同浓度Cy3 miR-155 NC成功转入足细胞内,且转染效率达80％以上.qRT-PCR结果显示转染miR-155mimics、miR-155 inihibitor 24 h后,miR-155在足细胞中的表达明显改变,与阴性对照组(NC)比较差异有统计学意义,表明转染成功.转染80 nmol∕mL浓度的miR-155mimics,miR-155在足细胞中的表达明显上调(P<0.001),与其他浓度对比表达量升高,差异有统计学意义.转染150 nmol∕mL浓度的miR-155 inihibitor,miR-155在足细胞中的表达明显下调(P<0.001),与其他浓度对比表达量降低,差异有统计学意义.结论 LipofectamineTM 2000达到适当剂量时将各工作浓度的miRNA-155转入足细胞内的转染效果高.80 nmol∕mL的miR-155mimics和150 nmol∕mL的miR-155 inhibitor可能较适合用于实验研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林栩	右江民族医学院附属医院肾内科	104	325	9.0	12.0
2	古贤君	右江民族医学院附属医院肾内科	13	52	5.0	6.0
3	凌霄雁	右江民族医学院附属医院肾内科	8	6	2.0	2.0
7	覃卿	右江民族医学院研究生学院	6	13	2.0	3.0
8	郑心彤	右江民族医学院附属医院肾内科	6	1	1.0	1.0
9	梁钊	右江民族医学院研究生学院	4	0	0.0	0.0
10	杜秀日	右江民族医学院研究生学院	4	0	0.0	0.0