SIRT1对牦牛卵母细胞体外成熟与老化的影响

• 作者: 字向东 李键 熊显荣 熊燕 王艳 邱翔
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: SIRT1 卵母细胞 成熟 老化 牦牛
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术与繁殖
• 页码范围: 2440-2448
• 页数: 9页
• 分类号: S823.85
• 字数: 5838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.12.008

摘要

旨在探索 SIRT1在牦牛卵母细胞体外成熟与老化过程中的作用.本研究在体外成熟液中分别添加SIRT1特异性激动剂 SRT2104(SRT组)和特异性抑制剂 Inauhzin(INZ组),牦牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外培养 24 h后,观察卵丘细胞的扩展和第一极体的排出情况;利用免疫荧光检测体外培养 24 与 36 h后卵母细胞内的 ROS水平;采用实时荧光定量 PCR法检测体外培养 24与 36 h后卵母细胞内 SIRT1、FOXO3a 、SOD2以及Bax的表达水平;体外培养 24与 36 h后的牦牛卵母细胞进行体外受精,观察并统计其卵裂率与囊胚形成率.结果显示,体外培养 24 h,SRT组的卵丘细胞扩展程度显著高于对照组(P＜0.05),而 INZ组的卵丘细胞扩展程度和第一极体排出率显著低于对照组(P＜0.05).随着体外培养时间的增加,卵母细胞内的 ROS水平显著增加(P＜0.05);添加 SRT2104能显著抑制卵母细胞中 ROS水平的积累(P＜0.05),而添加 Inauhzin则显著上调卵母细胞内的 ROS水平(P＜0.05).体外培养 24 h后,SRT组 SIRT1,FOXO3a与 SOD2的表达水平显著高于对照组(P ＜0.05),但 Bax的表达水平显著降低(P＜0.05); INZ组的 SIRT1,FOXO3a与 SOD2表达均显著低于对照组(P＜0.05),但 Bax的表达水平显著上调(P＜0.05).牦牛卵母细胞体外培养 24 h后,SRT组的卵裂率与囊胚形成率显著高于 INZ组和对照组(P＜0.05);卵母细胞体外培养 36 h 后,INZ组的卵裂率和囊胚形成率显著低于其他组(P＜0.05).综上表明,SIRT1参与了牦牛卵母细胞的体外成熟,在体外培养液中适当添加 SIRT1激动剂,有利于卵母细胞体外成熟及缓解老化,同时改善早期胚胎的发育能力.