HIF-1α对大鼠内皮细胞通透性的影响及作用机制

• 作者: 余又新 孙业祥 孟承颖 方林森 段声梁 王欢 胡子健 胡德林 蒋智永 蒋薇 黄海良
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠 内皮细胞 血管通透性 缺氧诱导因子-1α
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1061-1065
• 页数: 5页
• 分类号: R332|R977.6|R322.12
• 字数: 4084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.07.012

摘要

目的 探讨低氧诱导因子-1 (HIF-1α)对大鼠主动脉内皮细胞通透性的影响及作用机制.方法 构建HIF-1α干扰及过表达载体,应用Lipofectamine 2000转染原代大鼠主动脉内皮细胞,浓度为200 μg/ml遗传霉素(G418)筛选稳转细胞株,实时荧光定量PCR (RT-PCR)和Western blot检测HIF-1α、内皮素-1(ET-1)、内皮素受体A(ETA)、内皮素受体B(ETB)和闭锁小带(ZO-1)的表达;应用ET-1信号通路抑制剂BQ123及BQ788预处理HIF-1 α过表达细胞株1h,RTPCR和Westem blot检测HIF-1α、ET-1、ETA、ETB和ZO-1的表达,细胞膜通透性实验检测单层内皮细胞膜通透系数变化.结果 与转染短发夹RNA-阴性对照组(shRNA-NC组)相比,转染shRNA-Ⅱ组HIF-1 α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01),ZO-1的表达则明显升高(P＜0.01).与转染GV230组比较,稳转GV230/HIF-1α组HIF-1α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P＜0.01),ZO-1的表达则明显降低(P＜0.01);同时细胞膜通透性系数亦明显升高(P＜0.01);应用BQ123和BQ788处理能够抑制HIF-1α诱导的ETA和ETB表达、增强ZO-1的表达,同时细胞膜通透性系数明显降低(P＜0.01).结论 HIF-1α可通过上调ET-1的表达进而增加大鼠主动脉内皮细胞的通透性,HIF-1 α/ET-1信号轴在调控烧伤大鼠血管通透性方面具有重要作用.