阻断辅因子NADPH合成对谷氨酸棒杆菌生长及产物合成的影响

• 作者: 张伟国 徐建中 杨汉昆
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 谷氨酸棒杆菌 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 L-赖氨酸 代谢物
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 字数: 8104字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019690

摘要

该文通过敲除谷氨酸棒杆菌(C.glutamicum)中参与NADPH合成的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因(zwf)、苹果酸酶基因(malE),并将自身NADP+-依赖型异柠檬酸脱氢酶基因(icdcg)替换为变形链球菌(Streptococcus mutans)NAD+-依赖型异柠檬酸脱氢酶基因(icdsm),构建重组菌株C.glutamicum LYS △zwf △malE △icdcs∷icdsm,并研究阻断NADPH合成途径对胞内腺嘌呤核苷酸、吡啶核苷酸、细胞生长、葡萄糖消耗速率、产物合成的影响.与出发菌C.glutamicum LYS相比,重组菌胞内NADH提高38.58％,NADH/NAD+提高53.84％.而NADPH降低89.51％,明显低于出发菌,NADPH/NADP+降低93.13％.摇瓶结果表明,重组菌葡萄糖代谢能力明显减弱,生长也相对缓慢,菌体量降低4.36％.同时L-赖氨酸产量降低87.69％,而在胞内积累了大量副产物,如丙酮酸、乳酸等.为进一步研究NADPH调控L-赖氨酸产生菌胞内微环境的生理机制提供了研究基础.