利用体腔显微注射法实现非编码RNA在家蚕头部稳定过表达

• 作者: 李丹丹 杨宗霖 申雅文 路一平 阚云超 霍春月 马田田
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕 非编码RNA 组织 过表达载体 体腔显微注射
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 779-786
• 页数: 8页
• 分类号: Q522
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2019.07.001

摘要

[目的]通过体腔显微注射非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)过表达载体,研究注射后ncRNA在家蚕Bombyx mori幼虫不同组织中的表达情况,探索研究家蚕ncRNA功能的便捷方法.[方法]利用显微注射仪(玻璃显微注射针)在家蚕5龄第3天幼虫第7-8腹节褶皱处分别注射家蚕ncRNA Bm-15和Bm-152过表达载体piggyBac[A3-EGFP-A3-Bm-15]和piggyBac[A3-EGFP-A3-Bm-152],注射48 h后提取家蚕幼虫头、胸、尾部、腹部背板、腹部腹板和丝腺总RNA,荧光定量PCR检测Bm-15和Bm-152在家蚕幼虫不同组织中的表达情况.[结果]采用玻璃显微注射针造成的创伤面小,注射后家蚕出现感染和死亡的比例低于10％.注射ncRNA Bim-15过表达载体后,在家蚕幼虫头部和尾部都检测到Bm-15的显著性过表达,头部中Bm-15表达量较注射piggyBac[A3-EGFP]空载体时上升了17倍,在其他4个组织中Bm-15表达量与正常饲养组家蚕对照相比变化不显著.注射Bm-152过表达载体后,同样在家蚕幼虫头部和尾部都检测到Bm-152的显著过表达,其中头部中的表达量较注射piggyBac[A3-EGFP]空载体时上升了6.6倍.腹部背板和丝腺中Bm-152过表达效果也较明显,分别是注射piggyBac[A3-EGFP]空载体时表达量的3.4和4.5倍.[结论]体腔显微注射ncRNA过表达载体可以实现ncRNA在家蚕头部中稳定过表达.本研究为后续研究神经相关ncRNA的功能提供了较好的思路和方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阚云超	南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室	32	176	6.0	12.0
2	马田田	南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室	2	0	0.0	0.0
3	霍春月	南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室	2	0	0.0	0.0
4	杨宗霖	南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室	2	0	0.0	0.0
5	路一平	郑州大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
6	申雅文	南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室	1	0	0.0	0.0