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摘要:
肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)是一种促炎性辅助性T细胞(helper T cell,Th1)因子,能参与调节哺乳动物的排卵、胚胎发育和附植等生殖过程.本研究旨在通过检测TNF-α在牦牛(Bos grunniens)卵母细胞成熟及早期体外受精(in vitro fertilization,IVF)胚胎发育过程中的表达,探讨TNF-α在卵母细胞成熟与体外受精胚胎发育过程中的作用.本研究收集牦牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulusoocyte complexes,COCs),在体外进行成熟培养并受精,获得体外受精胚胎,并评估植入前各时期胚胎的发育能力.采用qRT-PCR、间接免疫荧光染色、Western blot等方法从基因和蛋白水平检测TNF-α在未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞和植入前各时期胚胎中的表达与分布.结果 表明:(1)2~4细胞胚胎、5~8细胞胚胎和桑椹胚的发育率分别为(61.59±0.31)%、(53.76±0.22)%和(26.88+0.32)%,囊胚率为(16.12±0.23)%;(2) qRT-PCR结果表明,未成熟COCs、成熟COCs、桑椹胚和囊胚均可检测到TNF-α基因的表达,其相对表达水平由高到低依次为成熟COCs、未成熟COCs、囊胚和桑椹胚,2~4细胞胚胎和5~8细胞胚胎无表达;(3) Western blot结果显示,TNF-α蛋白相对表达水平由高到低依次为成熟COCs、未成熟COCs、囊胚和桑椹胚,2~4细胞胚胎和5~8细胞胚胎无表达;免疫荧光染色结果显示,TNF-α蛋白主要分布在COCs、桑椹胚和囊胚的细胞质中,在细胞核中表达较弱.本研究表明,TNF-α可能在牦牛卵母细胞的成熟、受精和胚胎发育过程中发挥作用,也可能参与囊胚的细胞凋亡和附植过程.本研究为揭示TNF-α在牦牛生殖过程中的作用机制提供了理论依据.
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文献信息
篇名 TNF-α在牦牛卵母细胞及早期体外受精胚胎中的表达
来源期刊 农业生物技术学报 学科 农学
关键词 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 牦牛 体外受精 胚胎发育
年,卷(期) 2019,(8) 所属期刊栏目 研究论文与报告
研究方向 页码范围 1423-1433
页数 11页 分类号 S857.2
字数 7081字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.08.010
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牦牛
体外受精
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期刊影响力
农业生物技术学报
月刊
1674-7968
11-3342/S
大16开
北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室
2-367
1993
chi
出版文献量(篇)
4211
总下载数(次)
8
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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