MiR172介导的AP2-like转录因子表达对大岩桐花期调控的研究

• 作者: Fu GUO Hong-wu BIAN Mu-yuan ZHU Sheng-yun MA Wei-huai PAN Xiao-yan LI
• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 生物学
• 关键词: 花期 大岩桐 MicroRNA172 APETALA2-like (AP2-like)
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 页码范围: 322-331
• 页数: 10页
• 分类号: Q943.2
• 语种: 英文

摘要

目 的:本文通过研究microRNA172a(miR172a)对成花途径中关键靶基因 APETALA2类(AP2-like)的调控作用及其机理分析,探索通过操纵 miRNA表达改变观赏植物花期的基因工程分子育种新策略.创新点:本研究基于植物 miR172序列和功能的高度保守性,通过转基因的方法操纵大岩桐 miR172的表达,进而影响AP2-like基因的表达,并起到调控花期的作用.方 法:本研究借用拟南芥miR172a的已知序列构建组成型过表达载体 35S:miR172a和抑制 miR172表达的 35S:MIM172载体.利用农杆菌介导法成功获得了 35S:miR172a 过表达株系以及抑制 miR172作用的35S:MIM172株系,并利用cDNA末端快 速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)克隆得到了大岩桐 AP2-like cDNA全序列,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应技术(qPCR)检测转基因株系中 AP2-like 的表达变化.结 论:短日照条件下,35S:miR172a 过表达株系花期比野生型提前(47.00±2.16)天;35S:MIM172株系花期延迟(7.00±4.28)天.在35S:miR172a过表达株系中 miR172的表达水平明显上升,其靶基 因 SsAP2-like 的表达量明显下降;35S:MIM172株系中 miR172 的积累水平受到抑制,而SsAP2-like的表达量明显上升,表明miR172介导调控SsAP2的表达对大岩桐成花转变具有促进作用.通过改变 miR172的表达调控关键靶基因进而改变花期的方法可以作为调节观赏植物开花时间的有效策略.