新疆野苹果果实总RNA提取方法的筛选

• 作者: 夏春兰 张玉芳 闻志彬
• 来源期刊: 干旱区研究
• 关键词: 新疆野苹果(Malus sieversii) 总RNA 提取方法 改良CTAB法
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 植物生理
• 页码范围: 437-443
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13866/j.azr.2019.02.20

摘要

由于新疆野苹果(Malus sieversii)果实富含多糖、多酚、可溶性果胶及其他次生代谢物质,导致果实的总RNA提取相对比较困难,质量较差.因此,本试验以不同发育时期的新疆野苹果的果实为材料,采用TaKaRa试剂盒、全氏金试剂盒、田伟等改良的CTAB法、本试验改良的CTAB法(一)和CTAB法(二)这5种方法来摸索提取野苹果果实的总RNA的有效方法.结果 表明:2种试剂盒均无法从野苹果果实中提取出RNA;通过3种改良CTAB法提取的RNA,在琼脂糖凝胶上得到清晰的28S和18S条带,并且纯度均较高,OD260/OD280值在1.8～2.2之间、OD260/OD230值大于2.0.但是只有本试验改良CTAB法(一)获得较高的RNA产量,从5个不同发育时期的野苹果果实中提取的RNA平均值在116.79～474.76 μg·g-1.改良CTAB法(一)通过延长LiC1沉淀时间,将-20℃放置15 min改为4℃放置过夜(时间不超过16 h),可以有效地除去RNA中的杂质污染,使得RNA充分沉淀.这种改良方法耗时相对较长,需要2d,但是方法易于操作且提取成本较低.因此,改良CTAB法(一)是适用于提取野苹果果实(尤其是发育晚期)总RNA的有效方法,完全可以满足后期的分子生物学试验所需.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闻志彬	中国科学院新疆生态与地理研究所中国科学院干旱区生物地理与生物资源重点实验室	13	67	5.0	8.0
2	夏春兰	中国科学院新疆生态与地理研究所中国科学院干旱区生物地理与生物资源重点实验室	3	3	1.0	1.0
8	张玉芳	中国科学院新疆生态与地理研究所中国科学院干旱区生物地理与生物资源重点实验室	2	3	1.0	1.0