同位素稀释-超快速液相色谱-串联质谱法测定血清中25-羟基维生素D

• 作者: 周健 金米聪 陈晓红
• 来源期刊: 卫生研究
• 学科: 医学
• 关键词: 同位素内标法 超快速液相色谱-串联质谱法 25-羟基维生素D2 25-羟基维生素D3 3-epi-25-羟基维生素D3 差向异构体 血清
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 981-987
• 页数: 7页
• 分类号: Q565|R-331
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种快速、准确测定血清中25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3和3-epi-25-羟基维生素D3的同位素稀释-超快速液相色谱-串联质谱法.方法 血清样品经甲醇-乙腈沉淀蛋白后,采用正己烷萃取,萃取液利用氮气吹扫浓缩并以初始流动相为溶剂进行定容,以含0.1％甲酸的水溶液(V/V)和含0.1％甲酸的甲醇溶液(V/V)为流动相,采用梯度洗脱方式在Phenomenex Kinetex F5色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7 μm)上实现快速分离,采用多反应监测正离子模式检测,同位素内标法定量.结果 差向异构体25-羟基维生素D3和3-epi-25-羟基维生素D3在6 min内可达基线分离,并可准确定量测定25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3和3-epi-25-羟基维生素D3.3种目标物在0.5～50.0 μg/L范围内均呈良好线性关系(相关系数r＞0.9995),方法检出限为0.15μg/L,定量限为0.5μg/L.在3个加标水平(1.0、10.0和30.0 μg/L)下,回收率为84.3％～109.0％ (n=11),相对标准偏差(RSDs)为0.8％～6.8％.采用美国国家标准与技术研究院(NIST)的有证标准物(SRM 972a)的Level 1、Level 2、Level 3和Level 4进行方法验证,测定结果与标准参考值的相对偏差均小于5％.结论 建立的方法具有简便、快速、灵敏和准确的特点,适用于血清中25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3和3-epi-25-羟基维生素D3的同时测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金米聪	宁波市疾病预防控制中心浙江省微量有毒化学物健康风险评估技术研究重点实验室	51	490	13.0	19.0
2	陈晓红	宁波市疾病预防控制中心浙江省微量有毒化学物健康风险评估技术研究重点实验室	44	435	13.0	19.0
3	周健	宁波市疾病预防控制中心浙江省微量有毒化学物健康风险评估技术研究重点实验室	2	5	1.0	2.0