微小RNA-1266对钠通道蛋白表达和分布的影响

• 作者: 李彬 杨水祥
• 来源期刊: 中华老年心脑血管病杂志
• 关键词: 心房颤动 钠通道 微RNAs 转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 72-76
• 页数: 5页
• 字数: 3867字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0126.2019.01.018

摘要

目的 探讨心房颤动(AF)相关微小RNA-1266-5 p(miR-1266-5p)与AF相关钠离子通道蛋白α亚基编码基因SCNA5的靶向调控关系.方法 构建含有预测结合位点3'非翻译区(3'UTR)序列的靶基因,将其与阴性对照质粒以及miRNA共转染入人胚肾HEK293细胞,实验分为空白对照组、阴性对照组、实验一组(pcDNA3.1-SCN5A 3'UTR改建质粒+miR-1266)和实验二组(pcDNA3.1-SCN5A WT质粒,不合3'UTR端+miR-1266),荧光定量PCR法和Western blot法检测各组钠通道蛋白SCN5A mRNA和Nav1.5蛋白表达变化,免疫荧光实验观察SCN5A Nav1.5蛋白表达和分布变化.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,实验一组SCN5A mRNA表达分别下调49.4％和46.0％,差异有统计学意义(0.557±0.016 vs 1.101±0.132和1.031±0.020,P＜0.05),而实验二组SCN5A mRNA表达无显著变化(P＞0.05);实验一组SCN5A Nav1.5蛋白表达下降,而实验二组SCN5A Nav1.5蛋白表达无显著变化;实验一组和实验二组的SCN5A Nav1.5蛋白分布都无显著变化.结论 SCN5A可能是miR-1266的直接靶基因,miR-1266可能通过负性调控SCN5A表达参与AF电重构.