微量样本中N-糖组分析技术的发展与应用

• 作者: 孟波 崔新玲 应万涛 李晓宇 钱小红
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: N-糖链 糖组学 尿蛋白 基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱仪
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1416-1422
• 页数: 7页
• 分类号: O657.6
• 字数: 3766字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2019.12.002

摘要

针对糖组学分析面临的初始样本量需求较高的技术挑战,该研究发展了一种微量样本 N-糖链制备技术(GPAT),通过在移液枪头(Tip)中分别装填 C 18和 HILIC填料,实现了一站式原位蛋白消化、N-糖链释放和富集.与目前普遍采用的基于过滤辅助样品制备(FASP)技术的 N-糖组分析策略相比,使用 GPAT技术可以实现微量免疫球蛋白 G(IgG)和人肝癌 HepG2细胞提取蛋白的原位 N-糖链的释放和富集,样本起始量减少90％,可以从10μg IgG和10μg的HepG2细胞蛋白中分别检测到20条和39条N-糖链.从6例健康人(3例男性,3例女性)尿液中提取的10μg尿蛋白中检测到49条N-糖链.该方法实现了微量复杂蛋白样本 N-糖链简便、快速的定量分析策略,为进一步的糖组学方法推广应用奠定了基础.