lncRNA KCNQ1OT1在结肠癌细胞中的促癌功能和下游调控通路研究

• 作者: 冀天楠 张欣悦 怀思远 李建雄 赵志飞
• 来源期刊: 解放军医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌HCT-116、HT-29细胞 长链非编码核糖核酸 KCNQ1重叠转录物 微小核糖核酸125a-5p E3泛素连接酶SMURF1
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 570-579
• 页数: 10页
• 分类号: R735.35
• 字数: 5911字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2019.06.016

摘要

目的 明确lncRNA KCNQ1OT1在结肠癌HCT-116和HT-29细胞中的功能,探讨其作用的分子机制.方法 在结肠癌HCT-116和HT-29细胞系中转染KCNQ1OT1的过表达质粒及空白对照,siRNA干扰KCNQ1OT1及空白对照;分别在两个细胞系中进行CCK8、划痕实验、Transwell、细胞侵袭实验以验证KCNQ1OT1对细胞功能的影响;免疫共沉淀(RNAimmune precipitation,RIP)和双荧光素酶标记实验分别验证KCNQ1OT1与miR-125a-5p的特异结合以及miR-125a-5p和SMURF1蛋白的特异结合.过表达和敲低KCNQ1OT1、miR-125a-5p后,Western blot验证SMURF1的表达;完成过表达KCNQ1OT1同时过表达miR-125a-5p、敲低KCNQ1OT1同时敲低miR-125a-5p后检测SMURF1表达情况的Rescue实验,验证KCNQ1OT1与miR-125a-5p的调控关系.结果 在结肠癌HCT-116和HT-29细胞中,过表达的KCNQ1OT1能促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭;KCNQ1OT1敲低后,结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭受抑制;miR-125a-5p与KCNQ1OT1及SMURF1均能特异性结合;过表达KCNQ1OT1促进SMURF1的表达,敲低KCNQ1OT1抑制SMURF1的表达;过表达miR-125a-5p抑制SMURF1的表达,敲低miR-125a-5p促进SMURF1的表达;过表达KCNQ1OT1的基础上同时表达miR-125a-5p能显著抑制SMURF1的表达,敲低KCNQ1OT1的基础上同时敲低miR-125a-5p能促进SMURF1的表达.结论 在结肠癌细胞中,lncRNA KCNQ1OT1通过KCNQ1OT1-miR-125a-5p-SMURF1调控轴,促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李建雄	解放军总医院第一医学中心放射治疗科	25	73	6.0	7.0
2	赵志飞	解放军总医院第一医学中心放射治疗科	7	15	2.0	3.0
3	张欣悦	解放军总医院第一医学中心放射治疗科	6	25	3.0	5.0
4	怀思远	解放军总医院第一医学中心放射治疗科	2	0	0.0	0.0
5	冀天楠	解放军总医院第一医学中心放射治疗科	3	1	1.0	1.0