金黄色葡萄球菌肠毒素B精制免疫球蛋白对小鼠中毒模型的免疫救治效果研究

• 作者: 刘媛 李敏 李鑫 杨晓岚 杨鹏辉 段跃强 石艳春 范铁炯 谷宏婧 赵忠鹏 郑源强 闫芳 韩慧
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌肠毒素B 免疫球蛋白 动物模型
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 756-761
• 页数: 6页
• 分类号: R392-33
• 字数: 4022字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2019.06.005

摘要

目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F(ab′)2制品,为SEB中毒的救治提供候选药.方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达、纯化重组SEB,加入适量弗氏佐剂充分乳化,免疫马匹,测定免疫马匹血清中和抗体效价后采血,分离血清,按照成熟的生产工艺制备治疗性抗体成品;对成品进行安全性检测及免疫救治效果评价.结果:纯化的天然SEB经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90％,对小鼠腹腔注射的半数致死量为0.5μg/kg;纯化的重组SEB表达量超过2 mg/mL,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90％,对小鼠腹腔注射的半数致死量为50μg/kg;免疫马匹血清中和抗体效价达2000 U/mL以上时,采血并制备F(ab′)2成品,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度在80％以上,中和抗体效价超过2500 U/mL;安全性符合现行《中国药典》要求;对SEB中毒动物模型有很好的免疫救治效果.结论:建立了SEB精制免疫球蛋白制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为SEB中毒的救治提供了候选药.