自噬相关基因Atg3在埃博拉病毒组装过程中的作用研究

• 作者: 刘鑫 姚晓雨 王斌 范春玲 郑永辉
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 自噬(Autophagy) 自噬相关基因3(Atg3) 埃博拉病毒(EBOV) 囊膜蛋白(GP)
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 人类病毒研究论著
• 页码范围: 888-894
• 页数: 7页
• 分类号: R373.9|R511
• 语种: 中文
• DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003601

摘要

自噬是真核细胞清除胞内冗余物质的降解机制,也是细胞针对病原体入侵的一种天然免疫机制.自噬相关基因3 (Autophagy-related gene 3,Atg3)在细胞自噬发生过程中起决定性作用.为研究Atg3对埃博拉病毒(Ebola vvirus,EBOV)组装的影响,本研究首先根据CRISPR/Cas9技术构建了携带有Atg3基因靶向向导RNA (guide RNA,gRNA)、表达Cas9的重组质粒pSpCas-Atg3,将此质粒转染至人胚胎肾细胞293T中,之后采用流式分选结合有限稀释法筛选单细胞克隆.细胞基因测序及Western Blot试验表明成功获得了Atg3基因敲除的细胞系.在Agt3基因敲除细胞系和野生型细胞中分别共同转染表达EBOV囊膜蛋白(Glycoprotein,GP)和基质蛋白的重组质粒,包装病毒样颗粒(Virus-like particles,VLP);同时在两种细胞中组装整合有EBOV的重组HIV假病毒,获得的假病毒感染非洲绿猴肾细胞(Vero细胞),通过测定报告基因的活性判定病毒对细胞的侵入能力.结果 显示Atg3基因缺失后,VLP所整合的GP蛋白显著增多,假病毒对细胞的侵染能力也明显增强(P＜0.001),表明Agt3能够负调控EBOV的组装和入侵.本研究为开发新抗病毒药物提供了新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范春玲		40	104	6.0	7.0
2	刘鑫		20	47	5.0	6.0
3	王斌		1	0	0.0	0.0
4	姚晓雨		1	0	0.0	0.0
5	郑永辉		1	0	0.0	0.0