虎杖中一种新的2-吡喃酮合酶基因的克隆和功能研究

• 作者: 吴志军 曹杰 柴团耀 王晓伟 王红 胡红艳 陈默
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: Ⅲ型聚酮合酶 2-吡喃酮合酶 虎杖
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 699-710
• 页数: 12页
• 分类号: Q555.2|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.16476/j.pibb.2019.0037

摘要

4-羟基-6-甲基-2-吡喃酮(2-吡喃酮)及其衍生物是一类重要的植物次生代谢产物,具有抗虫、抗真菌等功能,在工业上可用于生产可再生化学平台间苯三酚和l,3,5-三氨基-2,4,6-三硝基苯.2-吡喃酮合酶(2PS),一种Ⅲ型聚酮合酶(PKSs),是合成2-吡喃酮的关键酶.本研究以中药材虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc)为材料,从中分离鉴定了一种新的2-吡喃酮合酶(Pc2PS).Pc2PS与已知的几种2PSs的氨基酸序列相似性为54％～56％.通过体外酶促反应鉴定功能发现,Pc2PS可以催化1分子乙酰-CoA与2分子丙二酰-CoA,缩合生成4-羟基-6-甲基-2-吡喃酮;也可以只利用3分子丙二酰-CoA,以相同的效率缩合生成2-吡喃酮.由此可以看出,乙酰-CoA存在与否并不影响该酶的催化效率.随后,我们测定了Pc2PS以丙二酰-CoA为单一底物时的酶动力学参数.虽然之前报道的2PSs也可以只利用丙二酰-CoA生成2-吡喃酮,但与Pc2PS不同的是,乙酰-CoA的缺失会大大降低催化效率.另外,对Pc2PS基因的组织表达特异性检测结果表明,该基因主要在虎杖根中表达,在叶中的表达量很低.本研究丰富了2PS的种类,并为2-吡喃酮的生物合成提供了基因资源.