烟草NtTkr尾部点突变对卷曲螺旋结构及与靶蛋白相互作用的影响

• 作者: 徐林娜 李芬 童文艳 胡孟可
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: NtTkr 卷曲螺旋 定点突变 蛋白相互作用
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 64-69
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0957

摘要

NtTkr是个在烟草分裂旺盛组织中优势表达的驱动家族新成员,尾部有3个卷曲螺旋(Coiled-coil,CC l-3),已知位于CC3 1084位的T缺失或点突变会影响其分布,推测该改变可能受与其结合的蛋白底物的影响.为确定T1084缺失或点突变对NtTkr与候选蛋白互作的影响,通过重叠延伸PCR在烟草NtTkr尾部引入T1084缺失(T1084d)和T1084A点突变,克隆入pGBKT7获诱饵表达载体,转入AH109并分别与携带pGADT7-H2A/Sulfer/NT3的Y187接合后进行双杂交检测.结果 表明T1084A与T相近,但先于T显蓝色,且颜色较T深;T1084d明显不如T;一级结构和Coiled-coil软件分析表明T1084处于CC3的a位,属极性亲水氨基酸,将其替换为非极性疏水的丙氨酸可增强七肽重复序列结构域(HR结构域)的疏水性,并造成七肽重复序列增长,T1084缺失则造成其缩短.表明增加HR结构域的疏水性和七肽重复序列的长度可增强NtKrp与候选蛋白的互作,而缩短卷曲螺旋的长度则造成其相互作用的减弱.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李芬	河南师范大学生命科学学院	35	84	5.0	7.0
2	徐林娜	河南师范大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0
3	胡孟可	河南师范大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
4	童文艳	河南师范大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0