食品中检测志贺氏菌的实时荧光RPA方法的建立与应用

• 作者: 刘立兵 姜彦芬 孙晓霞 王建昌 王金凤 陈志敏
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 志贺氏菌 ipaH 重组酶聚合酶扩增 检测
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 259-264
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.10.032

摘要

本研究旨在建立志贺氏菌的实时荧光重组酶聚合酶扩增技术real-time RPA)检测方法.根据志贺氏菌侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)的保守序列设计引物及exo探针,利用荧光检测设备实时监控反应进程,在39℃恒温下20 min即可完成检测.该方法特异性扩增志贺氏菌,对非志贺氏菌无扩增;以志贺氏菌基因组DNA为模板,该方法的检测灵敏度为3.5×10-3 ng/μL,同已发表的real-time PCR方法一致.人工污染试验表明,当鸡肉、西兰花样品污染量为9 CFU/25g,增菌时间为8 h时,即可通过real-time RPA方法检出志贺氏菌.在人工污染试验中,real-time RPA和real-time PCR检测结果一致,而前者仅需7～12 min,后者则至少需要35 min(Ct值为27～34之间).本研究建立的志贺氏菌real-time RPA方法特异性强,灵敏性高,反应时间短,操作方便,为食源性致病菌检测提供了一个新的技术平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜彦芬		4	3	1.0	1.0
2	王金凤		2	1	1.0	1.0
3	孙晓霞		4	3	1.0	1.0
4	王建昌		5	3	1.0	1.0
5	陈志敏		2	2	1.0	1.0
6	刘立兵		1	1	1.0	1.0