桑树中miR319的克隆及在雄花发育中表达分析

• 作者: 孙志超 李娜 李季生 杨帆 杨贵明 谢岩 高妍夏 高玉军
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 桑树 雄花发育 茉莉酸 miR319 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1459-1466
• 页数: 8页
• 字数: 4260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2019.08.1459

摘要

为探究miR319及靶基因在调控桑树雄花发育的分子机制,本研究通过石蜡切片技术判断桑树雄花芽发育时期及在线网站预测miR319的靶基因.结果 表明,桑树雄花芽发育分为未分化期(A1)、分化初期(A2)、花序分化期(A3)和总苞形成期(A4)4个不同的阶段;桑树中miR319家族存在miR319a、miR319b和miR319c 3个成员,其中miR319b与miR319c位于同一条前体序列上,预测并获得了miR319 6个靶基因.运用5'-RACE技术验证了miR319a的4个靶基因,其切割位点主要集中在与miRNA互补位点的第10和第11位碱基之间.采用RT-qPCR技术检测miR319a及靶基因在雄花发育不同阶段的表达水平,发现miR319a在雄花发育A2-A3阶段表达水平迅速降低,靶基因Morus012208、Morus008229、Morus008100与Morus005893在此阶段表达水平迅速升高,茉莉酸(JA)含量也迅速升高.同时,JA合成关键基因PLDα1和LOX5在雄花发育A2-A3阶段表达上调,表明miR319通过调控靶基因影响JA合成来调控桑树花序分化.本研究为揭示桑树miR319在JA途径中调控花发育中的分子调控机制奠定了一定的理论基础.