黄颡鱼自噬相关基因LC3B和Beclin1的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 叶汉梅 罗智 魏晓雷
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黄颡鱼 LC3B Beclin1 原核表达 多克隆抗体制备
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 页码范围: 1197-1202
• 页数: 6页
• 分类号: Q344+.1
• 字数: 5036字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2019.141

摘要

为深入研究黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco自噬的发生过程和机制,从黄颡鱼cDNA中克隆获得372和1344 bp的黄颡鱼LC3B(PfLC3B)和Beclin1(PfBeclin1)基因编码序列,并成功构建了pET32a(+)-PfLC3B和pET32a(+)-PfBeclin1重组表达载体,分别采用亲和层析和包涵体纯化的方法得到了纯度较高的重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白;以重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白免疫Balb/C小鼠,制备多克隆抗体.通过Western blot鉴定了PfLC3B和PfBeclin1抗血清可以分别特异性识别重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白;PfLC3B抗血清可以特异性识别黄颡鱼内源性LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白,PfBeclin1抗血清可以特异性识别黄颡鱼内源性Beclin1蛋白.蛋白水平的组织分布显示,黄颡鱼LC3和Beclin1蛋白在肝脏中表达水平均较高,在肾脏和脾脏中的表达水平较低.综上所述,研究成功制备了黄颡鱼LC3B和Beclin1的多克隆抗体,为深入研究黄颡鱼自噬机制提供了有力工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏晓雷	华中农业大学水产学院	2	1	1.0	1.0
2	叶汉梅	华中农业大学水产学院	2	1	1.0	1.0
3	罗智	华中农业大学水产学院	15	213	6.0	14.0