REPLI-g?Single Cell Kit应用于微量DNA扩增的效率评估

• 作者: 刘希玲 张佳怡 张轶伦 徐倩南 李成涛 李莉 沈琼
• 来源期刊: 法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医遗传学 短串联重复 全基因组扩增 多重置换扩增 微量检材
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 210-215
• 页数: 6页
• 分类号: DF795.2
• 字数: 5010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12116/j.issn.1004-5619.2019.02.015

摘要

目的 评估REPLI-g?Single Cell Kit应用于检材DNA扩增的效率,探讨该试剂盒在法医学微量DNA扩增方面的应用价值.方法 选取3种微量DNA提取试剂盒,对来自10名无关个体的外周血进行DNA提取,并对所提DNA的产量和纯度进行比较.根据比较结果选取1例DNA样本进行浓缩稀释作为全基因组扩增起始样本,使用REPLI-g?Single Cell Kit对起始样本进行全基因组扩增,计算扩增产量及扩增倍数,并进行琼脂糖凝胶电泳检测片段分布情况.使用Goldeneye?DNA身份鉴定系统20A对起始样本和经全基因组扩增所得DNA进行STR分型.结果 经比较后选取由QIAsymphony?DNA Investigator?Kit所提取的1例DNA进行浓缩稀释作为全基因组扩增起始样本.经REPLI-g?Single Cell Kit对一系列起始样本全基因组扩增后,发现扩增产量均值最低可达到8.77×103 ng,相应的扩增倍数均值为1.40×106,DNA片段大且集中.全基因组扩增样本随着起始样本量的减少,STR分型成功率降低,但当起始样本量低于0.5 ng时,全基因组扩增后样本的STR分型成功率高于相同起始量未经全基因组扩增样本的STR分型成功率.结论 应用REPLI-g?Single Cell Kit可有效提高模板DNA总量,特别对于微量DNA,可在一定程度上提高STR分型成功率.