16HBE细胞上皮间质转化模型建立以及麻黄-甘草药对对其影响

• 作者: 姚露 洪敏 王思齐 王霄彤 袁为远 郑劼 魏盼
• 来源期刊: 南京中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人支气管上皮细胞 上皮间质转化 TGF-β1 血清饥饿 药对
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 284-289
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 字数: 5408字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14148/j.issn.1672-0482.2019.0284

摘要

目的 体外诱导人支气管上皮细胞(16HBE)上皮间质转化(EMT)最适条件摸索以及探讨麻黄-甘草对EMT的影响.方法 以16HBE细胞株为研究对象,分别给予转化生长因子β1(TGF-β1)单一刺激以及血清饥饿联合刺激,运用Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达.运用免疫荧光检测E-Cadherin和N-Cadherin胞内表达分布情况.运用qPCR检测上皮及间质特征性基因的表达水平.血清饥饿联合TGF-β1刺激,给予麻黄-甘草药对干预,Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达水平.结果 TGF-β1可诱导16HBE细胞由结构规则、质密均匀的鹅卵石状向纺锤体状转化.TGF-β1单独刺激可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA蛋白表达升高,对E-Cadherin、ZO-1蛋白表达未见明显影响.而当细胞密度为15％时,血清饥饿联合TGF-β1可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA、Vimentin、Collagen Ⅰ蛋白、基因水平升高以及E-Cadherin、ZO-1蛋白、基因水平降低,并且E-Cadherin蛋白分布紊乱,上皮结构破坏.血清饥饿联合TGF-β1刺激,麻黄-甘草药对可抑制N-Cadherin、α-SMA的表达,并恢复E-Cadherin蛋白的表达,对ZO-1无明显影响.结论 血清饥饿联合TGF-β1能体外诱导16HBE细胞建立稳定可重复的EMT模型,可用于体外研究哮喘发生EMT相关机制.麻黄-甘草药对一定程度上可抑制16HBE细胞EMT过程.