俄罗斯鲟补体C7基因的克隆及表达分析

• 作者: 佘定懿 孙梦洁 张雪 江炎亮 沙珍霞 胡谋 许式见 赵爱云 陈亚东 高杰
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 俄罗斯鲟 补体C7 基因克隆 基因表达 免疫应答
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 页码范围: 763-770
• 页数: 8页
• 分类号: Q344+.1
• 字数: 6675字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2019.090

摘要

为研究俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti)补体C7基因(AgC7)的功能,采用RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技术,获得AgC7的cDNA全长序列为3103 bp,包括开放阅读框(Open Read Frame,ORF)2502 bp,编码833个氨基酸,5′-UTR(5′untranslated region)和3′-UTR的长度分别为44和554 bp.同源性分析表明,AgC7与其他鱼类补体C7如斑点雀鳝(Lepisosteus oculatus)、斑点叉尾鲴(Ictalurus punctatus)、斑马鱼(Danio rerio)、大西洋鲑(Salmo salar)、尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)氨基酸序列的一致性分别为56％、46％、49％、49％、47％,且都具有TSP1、LDLa、FIMAC和MACPF保守结构域.荧光定量qRT-PCR(quantitative Real-time PCR)结果表明,AgC7在血液、脑、鳃、性腺、心脏、头肾、肠、肝、肌肉、皮肤、脾、胃和后肾组织中均可表达,且在肠中表达水平最高;用含有壳寡糖的饲料饲喂俄罗斯鲟60d后,AgC7在这13种组织中表达均有增加,在肠中增加量最高,约为对照组的1.51倍;嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)可诱导AgC7,在血液、鳃、头肾、肠、肝和脾6种组织中瞬时上调表达,随着病原菌感染时间增加,基因表达量逐渐降低恢复至正常水平,其中,鳃中基因表达量的上调趋势最明显,最大表达量出现在感染后6h,为对照组的41.30倍,12h后基因表达下降并恢复至正常水平,表明AgC7基因可能参与了俄罗斯鲟抗细菌感染的免疫应答.俄罗斯鲟AgC7具有典型的补体C7基因特征,且壳寡糖刺激和病原感染后均可引起AgC7基因表达变化,补体C7可能参与了俄罗斯鲟的免疫应答.