核桃V-ATPase c亚基基因(JrVHAc4)的克隆和抗旱功能分析

• 作者: 刘玉梅 张尚昆 李大培 杨桂燕 王艺 赵焕元 赵翔
• 来源期刊: 南京林业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 核桃 干旱胁迫 V-ATPase 表达分析 酵母表达系统
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 79-85
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.201811014

摘要

[目的]V-ATPase是植物逆境响应的重要酶,有必要了解V-ATPase相关亚基参与核桃响应逆境胁迫的功能机制.[方法]从‘香玲’核桃转录组中克隆获得1条V-ATPase c亚基基因(命名为JrVHAc4),通过分析启动子预测其逆境响应功能.对JrVHAc4基因进行干旱胁迫下的表达分析,同时构建JrVHAc4酵母表达载体转入酵母表达系统研究其抗旱功能.[结果]JrVHAc4基因开放读码框(ORF)全长495 bp,拟推导的蛋白分子量为16 527.61 u,包含164个氨基酸,理论等电点为8.62;其上游1 047 bp启动子包含MYC、DOF、MYB等与干旱响应相关的顺式作用元件.干旱胁迫下,JrVHAc4基因在核桃叶和根中均被显著诱导,并存在差异.对JrVHAc4转基因酵母进行不同浓度甘露醇胁迫,与对照酵母相比,发现JrVHAc4基因的表达能显著提高转基因酵母的生长活性.[结论]JrVHAc4基因能响应干旱胁迫,并能提高酵母的抗旱能力,JrVHAc4可作为核桃抗逆重要候选基因.