海藻糖酶基因TRE2-like和TRE2在异色瓢虫羽化过程中的表达与功能

• 作者: 倪晓丽 唐斌 张萌 张道伟 曾伯平 李燕 王莎莎 肖仲久
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 异色瓢虫 海藻糖酶 TRE2-like TRE2 基因表达 酶活性 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 663-671
• 页数: 9页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2019.06.002

摘要

[目的]异色瓢虫Harmonia axyridis是一种重要的捕食性天敌昆虫,海藻糖在异色瓢虫的变态发育、羽化等整个生命过程都起着重要的作用.本研究以前期获得的类似膜结合型海藻糖酶(TRE2-like)与膜结合型海藻糖酶(TRE2)基因为基础,探讨在异色瓢虫羽化阶段这两个海藻糖酶的潜在功能,为阐明异色瓢虫从蛹发育到成虫时海藻糖代谢机制提供参考.[方法]根据TRE2-like和TRE2基因序列设计双链RNA(dsRNA)区域片段并合成对应的dsRNA,通过RNAi将其注射到异色瓢虫2日龄蛹中.采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测RNAi处理后羽化第1天的异色瓢虫成虫糖代谢相关基因的表达;同时采用蒽酮比色法、酶标法等分别测定RNAi处理后羽化第1天的异色瓢虫成虫主要糖类物质含量及TRE活性变化,并观察异色瓢虫羽化后的表型变化.[结果]结果表明,与对照组(dsGFP注射组)相比,异色瓢虫2日龄蛹被注射TRE2-like或TRE2 dsRNA后,其新羽化成虫体内TRE2-like和TRE2表达量均极显著下调,且少数个体出现了蜕皮与翅形成困难等畸形表型.可溶性海藻糖酶活性在注射dsTRE2-like后显著降低,膜结合型海藻糖酶活性在注射dsTRE2后显著降低;注射dsTRE2后糖原含量显著下降,注射ds TRE2-like后糖原和海藻糖含量显著下降,注射dsTRE2-like+ dsTRE2后糖原和葡萄糖含量显著下降,且海藻糖含量极显著下降.注射dsTRE2-like,dsTRE2和dsTRE2-like+ dsTRE2后可溶性海藻糖酶基因TRE1-1和TRE1-2表达下降或显著下降,而TRE1-5表达上升或显著上升,海藻糖合成酶(trealose-6-phosphate synthase,TPS)、糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase,GP)、糖原合成酶(glycogen synthase,GS)基因的表达均显著下调.[结论]TRE2-like和TRE2基因表达被抑制后,异色瓢虫海藻糖等代谢受到影响.研究结果为探究异色瓢虫体内膜结合型海藻糖酶的潜在功能和调控机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖仲久	遵义师范学院生物与农业科技学院	48	167	8.0	10.0
2	李燕	杭州师范大学生命与环境科学学院	7	11	2.0	3.0
3	张道伟	遵义师范学院生物与农业科技学院	12	53	5.0	7.0
4	曾伯平	遵义师范学院生物与农业科技学院	17	17	3.0	3.0
5	张萌	杭州师范大学生命与环境科学学院	45	202	8.0	12.0
6	王莎莎	杭州师范大学生命与环境科学学院	5	2	1.0	1.0
7	倪晓丽	杭州师范大学生命与环境科学学院	1	0	0.0	0.0
8	唐斌		4	0	0.0	0.0