光滑鳖甲肽聚糖识别蛋白ApPGRP的表达与功能分析

• 作者: 刘忠渊 徐鑫 杨晓霞 毛新芳
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 光滑鳖甲 肽聚糖识别蛋白 原核表达 金黄色葡萄球菌 肽聚糖 RNAi
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 653-662
• 页数: 10页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2019.06.001

摘要

[目的]旨在研究光滑鳖甲Anatolica polita肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)基因ApPGRP表达模式及其对下游免疫相关基因的表达调控,以及重组蛋白ApPGRP与细菌的结合能力.[方法]构建原核表达载体pET-28a-ApPGRP,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),诱导表达并纯化重组蛋白His-ApPGRP,分别测定其与金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和肽聚糖(peptidoglycan,PGN)的结合能力.金黄色葡萄球菌S.aureus刺激后,利用qRT-PCR检测光滑鳖甲6龄幼虫体内ApPGRP、抗菌肽基因ApAttacin2和ApAttacin1、防御素基因ApDefensin、丝氨酸蛋白酶基因ApSP和丝氨酸蛋白酶抑制剂基因ApSerpin等免疫相关基因的表达水平;采用RNAi技术沉默光滑鳖甲6龄幼虫体内ApPGRP基因的表达,并利用qRT-PCR分别检测RNAi处理以及RNAi后再用s.aureus刺激时幼虫体内上述基因的表达水平变化.[结果]通过原核表达获得了重组蛋白His-ApPGRP,其具有结合金黄色葡萄球菌和肽聚糖的能力.注射金黄色葡萄球菌后,检测的光滑鳖甲6龄幼虫免疫相关基因(ApSP除外)的表达都显著上调;RNAi沉默光滑鳖甲6龄幼虫ApPGRP后,其他免疫相关基因表达量均显著降低,其响应金黄色葡萄球菌刺激后的表达量也显著低于对照组.[结论]这些结果表明,ApPGRP在光滑鳖甲免疫防御中起着识别外源微生物,激活信号通路并调控抗菌肽表达的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐鑫	新疆大学生命科学与技术学院	11	70	6.0	8.0
2	毛新芳		2	0	0.0	0.0
3	杨晓霞	新疆大学生命科学与技术学院	1	0	0.0	0.0
4	刘忠渊		1	0	0.0	0.0