轴向负载诱导小鼠椎间盘退变模型的建立

• 作者: 余伟波 刘亦杨 劳杨骏 吴承亮 徐彬 沈立锋 盛红枫 裘一丹
• 来源期刊: 中医正骨
• 关键词: 椎间盘退行性变 小鼠 疾病模型,动物 轴向负载 热板 动物实验
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-6,14
• 页数: 7页
• 字数: 3989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6015.2019.05.001

摘要

目的:探讨建立轴向负载诱导小鼠椎间盘退变模型的有效方法.方法:将24只16月龄SPF级小鼠随机分为模型组和对照组,每组12只.每日10:00、15:00、19:00将模型组小鼠放入自制热板鼠笼中,打开热板并设定温度为50℃,从小鼠开始跳跃至力竭约10 min左右;对照组小鼠不做任何处理.分别于造模1个月和3个月后从模型组和对照组随机抽取6只小鼠,采用颈椎脱臼法处死,完整取下L3～4椎间盘和L3、L4椎体,制作连续冠状位切片后,分别行苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和阿尔新蓝-苏木素(alcian blue-hematoxylin,ABH)染色,在光学显微镜下观察腰椎间盘组织形态学变化,通过免疫组织化学染色法在光学显微镜下观察腰椎间盘组织中Ⅱ型胶原蛋白的表达情况,并通过绘图软件测量椎间盘高度和软骨终板厚度.结果:①腰椎间盘组织形态学观察结果.HE染色显示造模1个月及3个月后,对照组腰椎间盘组织基本正常;模型组腰椎间盘组织可见退行性改变,其中造模3个月后较造模1个月后退变更严重,椎间盘纤维环出现裂隙,软骨终板分层结构紊乱、排列不规则,髓核破坏或皱缩,软骨终板内出现多个骨化中心.ABH染色结果显示造模1个月和3个月后,对照组软骨终板细胞排列整齐,软骨终板细胞数目较多,软骨基质染色较蓝,部分推间盘软骨终板内存在较少呈红染的骨化中心,但骨化中心形态较小;模型组软骨终板细胞排列混乱,细胞数目明显减少,且软骨基质染色变浅,软骨终板出现多个骨化中心,且骨化中心形态较大.②腰椎间盘免疫组织化学观察结果.造模1个月和3个月后,对照组Ⅱ型胶原蛋白在髓核、纤维环内层和软骨终板均有阳性表达,染色较深;模型组Ⅱ型胶原蛋白的阳性表达在髓核中央及纤维环外层较对照组明显降低,且造模3个月后Ⅱ型胶原蛋白在髓核与纤维环外层的表达较造模1个月后降低更明显.③腰椎间盘形态学测量结果.造模1个月后,模型组椎间盘高度和软骨终板厚度均小于对照组[(0.211±0.063) mm,(0.289±0.050) mm,t =2.984,P =0.007;(0.074±0.011) mm,(0.097±0.015)mm,t =2.813,P =0.023];造模3个月后,模型组椎间盘高度与对照组比较,差异无统计学意义[(0.197±0.052)mm,(0.235±0.053) mm,t=1.478,P=0.163];模型组软骨终板厚度小于对照组[(0.060±0.012) mm,(0.093±0.018)mm,t=4.092,P=0.001].结论:用热板诱导小鼠跳跃,可以有效建立轴向负载诱导小鼠椎间盘退变模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈立锋		61	468	13.0	17.0
2	吴承亮		49	383	11.0	17.0
3	刘亦杨		33	196	9.0	12.0
4	余伟波		2	4	1.0	2.0
5	盛红枫		13	37	3.0	5.0
6	徐彬		4	8	1.0	2.0
7	劳杨骏		1	1	1.0	1.0
8	裘一丹		1	1	1.0	1.0