猪流感病毒H1N1亚型HA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 华琳 吴斌 彭忠 朱和超 朱莉莉 范桂芳
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 流感病毒血凝素蛋白 杂交瘤细胞 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 81-85
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3767字
• 语种: 中文

摘要

为获得H1N1亚型猪流感病毒(SIy)血凝素(HA)蛋白的单克隆抗体(McAb),选取A/swine/NanChang/H1N 1/2009毒株,病毒经增殖、超速离心后,收集病毒粒子作为免疫原,将SIV粒子包被建立了间接ELISA方法.将免疫4次的BALB/c小鼠,经间接ELISA测定小鼠血清效价,将效价高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(sp2/0)进行融合.采用间接ELISA的方法筛选效价高的阳性细胞孔,采用有限稀释法进行3轮亚克隆,得到了5株杂交瘤细胞株,分别命名为2C6、5G5、1D5、3G3、4F11.随后对5株杂交瘤细胞的亚型进行鉴定,显示2C6、1D5、4F11为IgM亚型,5G5、3G3为IgG1亚型,5株杂交瘤的L链均为k链.间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测表明,5G5能够与HA蛋白发生特异性的结合.本研究为进一步建立H1亚型SIV的相关检测方法及对HA蛋白的功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴斌	生猪健康养殖协同创新中心/华中农业大学动物医学院	4	34	3.0	4.0