一株鹿源牛种布鲁菌的鉴定及全基因组分析

• 作者: 丁家波 冯宇 孙石静 常维山 彭小薇 朱良全 牛凯 秦玉明 程汝佳 范学政 蒋卉 许冠龙
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁菌 生化鉴定 全基因组测序
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1666-1675
• 页数: 10页
• 分类号: S852.614
• 字数: 4984字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.08.016

摘要

本研究旨在对一株鹿源牛种布鲁菌(Brucella abortus)B J1进行全面鉴定,为研究鹿的布鲁菌病提供参考.将B.abortus BJ1培养后,挑取单菌落分别接种到含硫堇或碱性品红的TSA培养基,观察其生长状态;将接种有B.abortus BJ1的TSA平板分别置于普通生化培养箱和CO2培养箱37℃培养72 h,观察其对CO2的依赖性;通过醋酸铅培养基测定B.abortus BJ1生长过程中是否产生H2S;通过结晶紫染色和热凝集试验测定B.abortus BJ1的表型;通过平板凝集试验测定B.abortus BJ1单因子血清反应性;采用AMOS-PCR鉴定细菌种属;为测定其毒力,以1×109 CFU感染豚鼠,14d后测定豚鼠每克脾组织的含菌量.使用二代测序方法测其全基因组序列并对其进行分析和注释,将结果与B.abortus 2308比对,并通过Mauve软件进行系统进化分析.结果 显示:B.abortusBJ1不依赖CO2,产H2S,可以在含硫堇和碱性品红的培养基上生长;表型为光滑型,与M因子血清发生凝集;豚鼠脾含菌量为1.17×106～2.05×106CFU·g-1;基因组大小为3 270 584 bp,在基因编码区内与B.abortus 2308株相比有46处Indel差异,进化树分析显示与B.abortus 8416有较高的同源性.通过全面鉴定,确定B.abortus BJ1为牛种9型,为更深入地了解我国布病发生情况和鹿的布病防控提供参考.