高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 冯小宇 周德刚 孙丹 宋彦军 梅力 王林 韦海涛 高晓龙
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 微滴式数字PCR 绝对定量
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 27-30
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+1
• 语种: 中文

摘要

根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构蛋白(NSP2)基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计合成NSP2特异性的引物和TaqMan探针,建立了高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)检测方法.结果 显示,ddPCR最佳反应的引物和探针浓度分别为900 nM和250 nM;特异性和重复性检测结果表明,ddPCR具有良好的特异性和较高的重复性;灵敏度检测结果表明,ddPCR的检测灵敏度比荧光定量PCR高10倍;ddPCR的检测结果与标准品拷贝数的相关系数为R2=0.999 1,表明该方法检测结果具有良好的线性关系和可信度;用建立好的ddPCR方法对10份临床样品的高致病性PRRSV进行了拷贝数定量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦海涛		13	50	4.0	7.0
2	周德刚		12	47	4.0	6.0
3	王林		9	36	3.0	6.0
4	梅力		8	36	3.0	6.0
5	宋彦军		12	49	4.0	7.0
6	冯小宇		11	38	3.0	6.0
7	高晓龙		4	4	1.0	2.0
8	孙丹		2	0	0.0	0.0