摘要:
背景:研究已经证实, 在人的良恶性肿瘤中NGF/TrkA信号通路促进肿瘤细胞增殖、分化的效应与PI3K/AKT信号通路密切相关, 然而, 关于NGF/TrkA信号通路在椎管内神经鞘瘤发病机制的研究甚少.目的:观察神经生长因子β对椎管内神经鞘瘤细胞增殖的影响及初步研究NGF/TrkA信号通路在椎管内神经鞘瘤中的发病机制.方法:收集肿瘤标本并消化培养获得高纯度肿瘤细胞作为实验细胞;分别给予细胞不同浓度的神经生长因子β (15, 30, 60, 120, 240μg/L) 、K252a (100, 200, 300, 400, 500, 600 nmol/L) 、LY294002 (10, 20, 30, 40, 50, 60μmol/L) 、神经生长因子β (120μg/L) +K252a (TrkA受体抑制剂, 400 nmol/L) 、神经生长因子β (120μg/L) +LY294002 (PI3K抑制剂, 50μmol/L) 作用一定时间;通过MTT法评估细胞增殖情况, Western blot检测TrkA、AKT、p-AKT (Ther308) 、p-GSK-3β蛋白质的表达情况, RT-PCR检测TrkA、AKT蛋白质对应的mR NA表达情况.结果与结论:①与对照组比较, 神经生长因子β组细胞吸光值 (A值) 随神经生长因子β的质量浓度增加而升高 (P <0.05), 于120μg/L时升高幅度最大 (P <0.001), K252a、LY294002组细胞A值不断下降 (P <0.05), 分别于浓度400nmol/L、50μmol/L时下降幅度最大 (P<0.001);②神经生长因子β组中TrkA、p-AKT (Ther308) 、p-GSK-3β蛋白质的表达上调 (P <0.05), TrkA mRNA的表达也上调 (P <0.05);③神经生长因子β (120μg/L) +K252a (400 nmol/L) 组细胞A值下降 (P <0.001), TrkA、p-AKT (Ther308) 、p-GSK-3β蛋白质的表达下调 (P <0.05), TrkA mR NA的表达亦下调 (P <0.05);④神经生长因子β (120μg/L) +LY294002 (50μmol/L) 组细胞A值下降 (P <0.01), p-AKT (Ther308) 、p-GSK-3β蛋白质的表达下调 (P <0.05);⑤各组中AKT蛋白质及其对应的mR NA的表达无明显变化 (P>0.05);⑥结果表明, 神经生长因子β能够促进椎管内神经鞘瘤细胞增殖, 其增殖可能与NGF/TrkA信号通路中TrkA、p-AKT (Ther308) 及p-GSK-3β等蛋白质的表达水平有关.