MAPK/ERK信号通路在卵巢上皮性癌组织和细胞中的表达及其临床意义

• 作者: 亢铁金 关宏伟 姜丽 孙倩 张朋新 张秋萍 江雪莲 石红 祁文静 高景春
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 关键词: 卵巢肿瘤 丝裂原激活蛋白激酶类 细胞增殖 细胞凋亡 磷酸化
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 541-547
• 页数: 7页
• 字数: 6618字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2019.08.007

摘要

目的 探讨有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织和细胞中的表达及其临床意义.方法 (1)收集2004年1月-2013年12月大连医科大学附属第一医院收治的术后病理检查证实为卵巢癌的104例患者的石蜡标本,采用免疫组化SP法检测卵巢癌组织中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达,并分析其与各临床病理特征的关系.(2)蛋白印迹(western blot)法检测MAPK激酶(MEK)抑制剂——司美替尼(AZD6244)作用前后不同卵巢癌细胞(包括SKOV3、OV2008、C13、A2780S、A2780CP、OVCAR4、OVCAR5、OVCAR8和CAOV3细胞共9种)中p-ERK1/2、ERK1/2蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测AZD6244作用后不同卵巢癌细胞的增殖情况,流式细胞仪检测AZD6244作用后不同卵巢癌细胞的凋亡率及细胞周期比例.结果 (1)免疫组化SP法检测显示,p-ERK1/2蛋白的阳性表达率与卵巢癌患者的年龄、病理类型、手术病理分期、术前血清CA125水平均无明显相关性(P＞0.05).进一步分析发现,在不同病理类型的卵巢癌组织中,p-ERK1/2蛋白的阳性表达率,高级别浆液性癌、黏液性癌及子宫内膜样癌均低于低级别浆液性癌(LGSC),分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);而透明细胞癌与LGSC比较,差异则无统计学意义(P=0.196).(2)western blot法检测显示,p-ERK1/2、ERK1/2蛋白在9种卵巢癌细胞中均有不同程度的表达;不同浓度(5、10 μmol/L)的AZD6244分别作用于OVCAR5和OVCAR8细胞后,均可抑制p-ERK 1/2、细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达,且AZD6244作用后可伴有PARP裂解片段的出现.MTF比色法检测显示,不同浓度(0、2.5、5、10、25、50、100 μmol/L)的AZD6244作用后,OVCAR5、OVCAR8和A2780S细胞增殖的抑制率均随着AZD6244浓度的增高而降低,呈显著的浓度依赖性(P＜0.05).流式细胞仪检测显示,不同浓度(0、5、10 μmol/L)的AZD6244作用后,OVCAR5、OVCAR8和A2780S细胞的凋亡率均随着AZD6244浓度的增高而增高,呈显著的浓度依赖性(P＜0.01);OVCAR5和OVCAR8细胞的G0/G1期比例显著增高,S期比例显著降低,呈显著的浓度依赖性(P＜0.05).结论 作为MAPK/ERK信号通路的活化形式和功能单位,p-ERK1/2蛋白在卵巢癌组织和细胞中均有不同程度的表达,MEK抑制剂可抑制卵巢癌细胞的增殖、诱发卵巢癌细胞的凋亡.提示,MAPK/ERK信号通路可能在卵巢癌发生、发展中起一定作用,抑制该信号通路有望成为临床治疗卵巢癌的新靶点.