VEGF/PELA/bFGF混合微囊促进大鼠BMSCs成血管分化研究

• 作者: 于庆贺 张国炜 殷杰 赵胜利 闵少雄
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 关键词: BMSCs VEGF bFGF 聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸共聚物 内皮分化
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 干细胞与组织工程
• 页码范围: 243-251
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1002-1892.201808099

摘要

目的 观察VEGF/聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸共聚物(polylactide-polyethyleneglycol-polylactic acid copolymer,PELA)/bFGF对SD大鼠BMSCs成血管分化作用.方法 经全骨髓贴壁法分离培养BMSCs并传代.取第3代BMSCs行Wright-Giemsa染色及流式细胞术鉴定.利用复乳溶剂挥发法制备VEGF/PELA/bFGF (A组)、PELA/bFGF(B组)、VEGF/PELA(C组)及PELA(D组)微囊.对PELA微囊行降解性能及细胞毒性检测,VEGF/PELA/bFGF混合微囊行VEGF及bFGF体外释放检测.取4组微囊缓释上清液分别与第3代BMSCs培养.培养1、3、7、14、20 d于倒置显微镜下观察细胞形态变化;21 d时,行摄取Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-labeled acetylated low density lipoprotein,Dil-ac-LDL)及FITC标记的荆豆凝集素(FITC-labeled ulex europaeus agglutinin I,FITC-UEA-I)实验,观察细胞摄取能力;同时行Matrigel基质胶小管形成实验,定量分析小管形成指标(节点数、交叉点数、主干数及主干长度).结果 经鉴定分离培养的细胞为BMSCs.PELA微囊在37℃恒温条件下降解时程超过20 d,且对BMSCs活力无明显影响.VEGF/PELA/bFGF混合微囊体外释放检测显示,至20 d时VEGF、bFGF累积释放量分别超过95％、80％.倒置显微镜下观察共培养期间A、B、C组BMSCs均出现形态学变化,其中A、B组20 d细胞呈典型内皮细胞“铺路石”样改变.荧光显微镜观察,A组双荧光标记细胞最多,B组次之,C组较少,D组几乎不具备内皮细胞特有的摄取功能.Matrigel基质胶小管形成实验示,A、B组诱导细胞在Matrigel基质胶上均形成网格状结构;定量分析显示A、B组节点数、交叉点数、主干数以及主干长度均多于C、D组(P＜0.05).A组节点数以及主干长度多于B组(P＜0.05);两组交叉点数、主干数差异无统计学意义(P＞0.05).结论 VEGF/PELA/bFGF混合微囊具有显著促进BMSCs成血管分化的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵胜利		1	0	0.0	0.0
2	殷杰		1	0	0.0	0.0
3	于庆贺		1	0	0.0	0.0
4	张国炜		1	0	0.0	0.0
5	闵少雄		1	0	0.0	0.0