天麻素通过蛋白激酶B/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制H9c2心肌细胞凋亡

• 作者: 姜永良 孙林 张玲 普俞维 杨萍 谢立秋 陆地
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 天麻素 心肌缺血/再灌注损伤 p38丝裂原活化蛋白激酶 免疫印迹法 免疫荧光双标记法 流式细胞术 大鼠
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 细胞和分子生物学
• 页码范围: 40-48
• 页数: 9页
• 分类号: R963
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2019.01.008

摘要

目的 采用血清剥夺/复灌的大鼠H9c2心肌细胞模拟心肌缺血/再灌注损伤(I/R),从细胞层面探讨天麻素(gastrodin)抗H9c2心肌细胞凋亡的作用及其机制.方法 体外培养H9c2心肌细胞随机分为对照组、血清剥夺(0.5～6 h)处理组、血清剥夺/复灌(2/4 h)处理组、天麻素(10、20和40μmol/L)处理组、天麻素(20 μmoL/L)+渥曼青霉素(wortmannin)(1μmol/L)处理组、wortmannin(1μmol/L)处理组.采用免疫印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt以及凋亡相关蛋白cleavedCaspase-3、Bcl-2和Bax的表达变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡;通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Caspase-3、Bcl-2和Bax的mRNA表达变化;采用免疫荧光双标记法检测细胞内p-Akt蛋白水平表达的变化.结果 血清剥夺(0.5～6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理诱导细胞凋亡水平增加;加入不同浓度天麻素处理,与血清剥夺(0.5～6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理组比较,凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3表达降低,Bcl-2/Bax蛋白表达的比值上调(P＜0.05),基因转录水平检测的Caspase-3和Bax表达量降低,Bcl-2表达量上调((P＜0.05),流式细胞术凋亡检测结果也同样显示,天麻素能抑制血清剥夺/复灌(2/4 h)诱导的细胞凋亡(P＜0.05);同时,血清剥夺(0.5～6 h)和血清剥夺/复灌(2/4 h)处理能抑制Akt/p38MAPK信号通路;加入不同浓度的天麻素(10、20和40μmol/L)处理后,p-Akt的表达水平增多,p-p38MAPK蛋白表达减少(P＜0.05).加入Akt的特异性抑制剂wortmannin(1μmol/L)处理后,天麻素对上述因子的调控作用被反转(P＜0.05).结论 在H9c2心肌细胞中,天麻素通过激活Akt/p38MAPK信号通路,抑制血清剥夺/复灌诱导的细胞凋亡,从而发挥抗心肌I/R损伤的保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆地	昆明医科大学生物医学工程研究中心	33	91	5.0	7.0
2	杨萍	昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系	19	68	6.0	7.0
3	孙林	昆明医科大学第二附属医院心血管内科	30	134	6.0	10.0
4	张玲	昆明医科大学生物医学工程研究中心	9	7	2.0	2.0
5	姜永良	昆明医科大学第二附属医院心血管内科	2	1	1.0	1.0
6	普俞维	昆明医科大学第二附属医院心血管内科	2	1	1.0	1.0
7	谢立秋	昆明医科大学第二附属医院心血管内科	1	1	1.0	1.0