辛伐他汀诱导的骨髓间充质干细胞成骨分化过程中Hedgehog信号通路的作用

• 作者: 刘子洪 吴春芳 张国彬 张钰英 迟博婧 邢磊 郭志斌
• 来源期刊: 国际药学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Hedgehog信号通路 Gli1 骨髓间充质干细胞 辛伐他汀 成骨分化
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 832-839
• 页数: 8页
• 分类号: R681.4|R979.9
• 字数: 4628字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13220/j.cnki.jipr.2019.11.005

摘要

目的 在研究辛伐他汀(SIM)诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨分化作用的基础上,结合应用Hedgehog信号通路阻断剂环巴胺cyclopamine(Cpn),探讨Hedgehog通路是否参与辛伐他汀刺激BMSC成骨分化的过程.方法 采用全骨髓贴壁培养法提取大鼠BMSC,在诱导培养基(CM)、含SIM或SIM+Cpn的诱导培养基中培养.采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法,检测细胞中ALP的表达;通过免疫荧光染色观察细胞中Gli1及骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法,检测细胞中Gli1、ALP、Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,COLI)及OCN mRNA的表达;采用蛋白质印迹技术,分析细胞中Gli1、Runx2、COLI及OCN的表达,通过茜素红染色检测细胞钙结节形成及基质矿化能力.结果 SIM组ALP表达水平显著高于CM组(P＜0.05),而SIM+Cpn组ALP表达水平则显著低于SIM组(P＜0.05),但仍高于CM组.免疫荧光检测显示,SIM在有(无)Cpn存在的情况下均可促进Gli1及OCN的表达;给药第10和18天SIM组Gli1、ALP、OCN及COLI mRNA表达水平均显著高于CM组(P＜0.05),且这种改变不能被Cpn完全阻断;给药第10和18天SIM组Gli1、Runx2、COLI及OCN蛋白表达显著高于CM组(P＜0.05),SIM+Cpn组显著低于SIM组(P＜0.05).茜素红染色结果提示,SIM组基质矿化能力显著高于CM组、SIM+Cpn组(P＜0.05).结论 SIM可通过上调Gli1及ALP、Runx2、COLI及OCN等成骨标志物表达,诱导BMSC成骨分化,且Cpn无法完全阻断该作用.相关机制有待进一步研究阐明.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邢磊		16	28	4.0	4.0
2	张国彬		12	51	4.0	6.0
3	刘子洪		10	32	3.0	5.0
4	张钰英		3	1	1.0	1.0
5	迟博婧		3	0	0.0	0.0
6	郭志斌		2	0	0.0	0.0
7	吴春芳		1	0	0.0	0.0