耳蜗移植神经干细胞的培养和鉴定

• 作者: 刘俊 吴佳源
• 来源期刊: 听力学及言语疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SD大鼠 神经干细胞 悬浮培养 鉴定
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 405-409
• 页数: 5页
• 分类号: R764.35
• 字数: 5255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7299.2019.04.014

摘要

目的 以SD孕鼠的胎鼠海马组织为原材料来分离培养神经干细胞,为后续干细胞移植实验奠定基础.方法 分离3只孕14～15天的SD大鼠胚胎海马组织,用无血清培养技术悬浮培养神经干细胞,测量神经干细胞球的数量和直径.用免疫组化荧光技术检测其巢蛋白(Nestin)的表达;掺入5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu),并用免疫荧光双标技术观测神经干细胞的增殖状况.采用荧光染料Hoechest33342标记神经干细胞,然后用10％胎牛血清诱导其分化,用免疫组化荧光技术鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)、星状胶质细胞特异性表达的胞浆蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质细胞的特异性抗原2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNP),以确定培养细胞为神经干细胞.结果 用大鼠胚胎海马组织可以成功分离神经干细胞,并可以在体外培养下稳定增殖传代,培养的神经干细胞及经胎牛血清诱导分化后的神经干细胞,经免疫组化荧光技术鉴定后可成功表达特异性标志物Nestin、NSE、GFAP、CNP.结论 以SD胎鼠海马组织为原材料分离培养的神经干细胞具有自我更新能力,并能分化成神经元、星状胶质细胞及少突胶质细胞,获取的细胞可用于干细胞移植.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘俊		14	8	2.0	2.0