Methocult M3534培养基培养小鼠c-kit+心脏干细胞向心肌细胞和窦房结细胞分化的结果观察

• 作者: 冀天基 姜爱侠 文德重 李奋 石林
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: Methocult M3534培养基 心脏干细胞 心肌细胞 窦房结细胞 细胞外调节蛋白激酶
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 分类号: R725.4
• 字数: 4421字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2019.09.008

摘要

目的 观察Methocult M3534(简写为M3534)培养基培养小鼠c-kit+心脏干细胞(CSCs)向心肌细胞与窦房结细胞分化的结果.方法 首先测定成年小鼠c-kit+CSCs的自我增殖能力和多向分化潜能,然后置于CSCs常规培养基(对照组)或含1％M3534的培养基(M3534组)中培养.培养2周或3周后分别通过RT-PCR、细胞免疫荧光染色检测心肌细胞特异标记物(Gata4、cTnI、Serca2a和 α-SA)和窦房结细胞特异标记物(Hcn2、Hcn4、Gata6、Tbx3、Tbx5和Cx45)的基因和蛋白;应用Western blotting法检测两组中Serca2α、Hcn4、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-Erk)和总细胞外调节蛋白激酶(t-Erk)蛋白(检测Erk信号通路在细胞分化中的作用),并比较.结果 分离纯化的c-kit+CSCs具有自我增殖和多向分化能力.培养3周时,与对照组比较,M3534组c-kit+CSCs心肌细胞特异标记物Gata4、cTnI、Serca2a和 α-SA基因表达升高,Serca2α、α-SA阳性细胞率升高(P均<0.05);M3534组上述心肌细胞特异标记物培养3周高于培养2周时(P均<0.05).培养3周时,与对照组比较,M3534组c-kit+CSCs窦房结细胞特异标记物Hcn2、Hcn4、Gata6、Tbx3、Tbx5和Cx45基因表达升高,Hcn4阳性细胞率升高(P均<0.05);M3534组上述窦房结细胞特异标记物培养3周高于培养2周时((P均<0.05).培养3周时,与对照组比较,M3534组Serca2α、HCN4蛋白表达及p-Erk1/2/t-Erk1/2升高(P均<0.05);M3534组培养2周时Serca2α、HCN4蛋白表达及p-Erk1/2/t-Erk1/2高于培养3周时(P均<0.05).结论 与CSCs常规培养基比较,M3534培养基培养的c-kit+CSCs向心肌细胞和窦房结细胞分化的效能更高,分化过程中可能有Erk通路参与.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李奋	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心	74	354	9.0	14.0
2	姜爱侠	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心	3	2	1.0	1.0
3	冀天基	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心	2	1	1.0	1.0
4	文德重		5	1	1.0	1.0
5	石林	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心	1	0	0.0	0.0