维生素D3对严重烧伤小鼠肠黏膜屏障的作用

• 作者: 刘馨竹 张玉龙 彭毅志 杨子晨 游波 石云龙 陈婧 陈平 陈渝 陈雅洁
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 创伤和损伤 细菌移位 紧密连接蛋白 维生素D3 肠黏膜屏障
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 284-291
• 页数: 8页
• 字数: 5985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2019.04.008

摘要

目的 探讨维生素D3对严重烧伤小鼠肠黏膜屏障的作用. 方法 将42只C57B L/6C雄性8 ～12周龄小鼠按随机数字表法分为维生素D3溶剂+假伤组7只、维生素D3溶剂+烧伤组14只、维生素D3+假伤组7只、维生素D3+烧伤组14只.维生素D3溶剂+假伤组及维生素D3溶剂+烧伤组小鼠实验前1、24、48 h腹腔注射0.1 mL维生素D3溶剂,维生素D3+假伤组和维生素D3+烧伤组小鼠于相同时间点腹腔注射将按100 ng/kg计算的维生素D3溶于0.1 mL维生素D3溶剂中配制的维生素D3溶液.维生素D3溶剂+烧伤组及维生素D3+烧伤组小鼠背部浸于98 ℃热水中3～4s致30％体表总面积Ⅲ度烫伤(以下称烧伤).维生素D3溶剂+假伤组及维生素D3+假伤组小鼠背部浸于37℃温水中3～4s致假伤.伤后24 h,取7只维生素D3溶剂+假伤组、7只维生素D3+假伤组小鼠断颈处死;伤后6、24 h,分别取7只维生素D3溶剂+烧伤组、7只维生素D3+烧伤组小鼠断颈处死,取肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结及肠组织.取各组小鼠肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结,观察细菌生长情况,并行细菌计数.取各组小鼠肠组织,采用免疫组织化学法检测带状闭合蛋白1(ZO-1)及咬合蛋白的表达,免疫荧光法检测ZO-1分布,蛋白质印迹法检测咬合蛋白的表达.对数据行Kruskal-WallisH检验、Nemenyi检验、单因素方差分析、t检验及Bonferroni校正. 结果 (1)伤后6、24 h,维生素D3溶剂+烧伤组小鼠肠系膜淋巴结、肝脏、脾脏细菌载量显著高于维生素D3溶剂+假伤组(P＜0.05).伤后6h,维生素D3+烧伤组小鼠肝脏、脾脏的细菌载量明显低于维生素D3溶剂+烧伤组(P＜0.05).伤后24 h,维生素D3+烧伤组小鼠肠系膜淋巴结、肝脏细菌载量明显低于维生素D3溶剂+烧伤组(P＜0.05).(2)伤后6、24 h,维生素D3溶剂+烧伤组小鼠肠组织ZO-1及咬合蛋白表达明显低于维生素D3溶剂+假伤组,维生素D3+烧伤组小鼠肠组织ZO-1及咬合蛋白表达与维生索D3+假伤组相近.伤后6、24 h,维生素D3+烧伤组小鼠肠组织ZO-1及咬合蛋白表达明显高于维生素D3溶剂+烧伤组.(3)伤后6、24 h,与维生素D3溶剂+假伤组相比,维生素D3溶剂+烧伤组小鼠肠黏膜上皮ZO-1分布不连续;维生素D3+假伤组小鼠肠黏膜上皮ZO-1分布正常,维生素D3+烧伤组小鼠肠黏膜上皮ZO-1分布连续性良好.(4)维生素D3溶剂+烧伤组小鼠伤后6、24 h肠组织咬合蛋白表达分别为0.720±0.003、0.638±0.052,显著低于维生素D3溶剂+假伤组的0.918±0.003(t=57.33、5.36,p＜0.05);维生素D3+烧伤组小鼠伤后6、24 h肠组织咬合蛋白表达为0.994±0.058、1.064±0.060,与维生素D3+假伤组的0.938±0.023相近(t=0.91、1.96,P＞0.05).维生素D3溶剂+烧伤组小鼠伤后6、24 h肠组织咬合蛋白表达明显低于维生素D3+烧伤组(t=4,75、5.35,P＜0.05). 结论 严重烧伤早期小鼠即可发生肠道细菌移位,而维生素D3可通过保护肠上皮紧密连接蛋白,从而起到保护肠黏膜屏障,减少肠道细菌移位的作用.