葫芦素B对IL-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响

• 作者: 左瑞庭 王西彬
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 软骨细胞 骨关节炎 白细胞介素1β NF-κB 炎性介质 葫芦素B
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 1210-1214
• 页数: 5页
• 分类号: R684
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20191918

摘要

目的 明确葫芦素B对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响.方法 用不同浓度(0.5、1、5、10、20μmol/L)的葫芦素B处理小鼠软骨细胞,随后用IL-1β(10μg/L)处理.采用CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及Caspase-3的活性,确定葫芦素B最佳处理浓度.采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞胞外基质代谢相关的Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及蛋白多糖aggrecan、基质金属蛋白酶(MMP)-3及MMP-13的mRNA水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测MMP-3、MMP-13、前列腺素E2(PGE2)的水平,同时检测一氧化氮(NO)的产生;采用Western blot分析葫芦素B对IL-1β介导的软骨细胞中核因子(NF)-κB信号通路活化的影响.结果 葫芦素B剂量依赖性地减弱IL-1β对软骨细胞存活的抑制效应(P<0.05),同时抑制IL-1β诱导的LDH释放、细胞凋亡及Caspase-3活性(P<0.05),10μmol/L是其最佳实验剂量.与IL-1β处理组相比,葫芦素B处理可减缓IL-1β对CollagenⅡ、aggrecan的mRNA表达抑制效应(P<0.05).此外,葫芦素B还可抑制IL-1β诱导的MMP-3及MMP-13的mRNA表达及释放(P<0.05),降低炎性介质NO、PGE2的产生(P<0.05).同时,IL-1β可明显上调软骨细胞中p-IκB、p-p65 NF-κB的表达,而葫芦素B则可抑制上述分子的表达(P<0.05).结论 葫芦素B可能通过阻断NF-κB信号通路的激活抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤及代谢紊乱,提示其具有潜在的抗骨关节炎的功效.