表达非洲猪瘟病毒P72蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定

• 作者: 刘拂晓 吴晓东 张永强 樊晓旭 王志亮 胡永新 赵永刚
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 复制缺陷型腺病毒 P72蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1635-1641
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 4541字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.08.012

摘要

本研究旨在构建能够表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白的缺陷型重组腺病毒.参考ASFV China-SY18株的基因序列,合成B646L基因.先将合成的B646L基因通过TOPO连接克隆到过渡载体pENTR/D-TOPO中;再将插入B646L基因的过渡载体pENTR/D-TOPO-ASFV-P72与pAd/CMV/V5-DEST腺病毒骨架载体进行重组,得到pAd-ASFV P72重组质粒;重组质粒经Pac Ⅰ酶切线性化后转染293A细胞,连续传代后获得重组腺病毒.结果 表明,获得的Ad5-ASFV-P72重组腺病毒的滴度为2.53×109 IFU·mL-1;经免疫荧光方法及Western blot鉴定ASFV-P72蛋白在Vero细胞中成功表达,且能够与ASFV标准阳性血清发生特异性反应.本研究成功获得能够表达ASFV P72蛋白的重组腺病毒Ad5-ASFV-P72,不仅为ASFV多基因重组腺病毒载体疫苗的研制奠定了一定基础,还为ASFV相关血清学诊断方法的建立提供了安全有效的抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志亮		134	936	18.0	25.0
2	赵永刚		34	155	7.0	11.0
3	吴晓东		53	281	10.0	14.0
4	张永强		13	103	4.0	10.0
5	樊晓旭		14	67	4.0	8.0
6	刘拂晓		4	17	1.0	4.0
7	胡永新		1	0	0.0	0.0