外泌体源性miRNA-200b对糖氧剥夺/再灌注相关神经元损伤的影响

• 作者: 张儒舫 李红梅 沈立 葛俊文
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖氧剥夺/再灌注 神经元损伤 miR-200b 外泌体
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 32-37
• 页数: 6页
• 分类号: R320.27
• 字数: 4725字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2019.05.009

摘要

目的 检测糖氧剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)刺激后,海马细胞外泌体中miR-200家族的表达;探索外泌体源性miR-200家族对OGD/R诱导的神经元细胞损伤的影响.方法 分离培养大鼠原代海马细胞,收集OGD/R刺激前后的外泌体,应用电镜观察、Western blot法、纳米粒子跟踪分析技术鉴定外泌体,实时PCR检测外泌体内miR-200家族的表达,选取其中表达差异最显著的miR-200b进行深入研究.分别将以上两组外泌体及antagomiR-200b预处理后的OGD/R外泌体与正常海马细胞共培养,实时PCR检测共培养的受体细胞内miR-200b的表达;MTT检测受体细胞增殖情况;DHE探针检测受体细胞内活性氧水平;Western blot法检测共培养细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl和促凋亡蛋白Bax含量.结果 OGD/R刺激后海马细胞外泌体内miR-200家族表达上调,其中miR-200b上调最显著;此外泌体与正常海马细胞共培养后,受体细胞内的miR-200b水平上调(P＜0.01),并导致细胞增殖受抑、细胞内ROS水平升高、细胞内Bcl-xl和Bcl-2蛋白显著降低,Bax蛋白表达升高(P＜0.01).预先以antagomiR-200b处理之后,受体细胞内miR-200b表达降低,OGD/R导致的细胞损伤作用得到恢复(P＜0.01).结论 miR-200b在OGD/R刺激海马细胞分泌的外泌体中发挥重要作用,外泌体可以通过运载miR-200b促进海马神经元细胞OGD/R损伤的形成.