葡萄GLRaV-3和GRSPaV病毒双重PCR方法建立及初步应用

• 作者: 乔光 李升 李玲玉 王嘉福 龙天文
• 来源期刊: 中国南方果树
• 关键词: 葡萄卷叶相关病毒3 葡萄茎痘相关病毒 多重PCR
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 72-77
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13938/j.issn.1007-1431.20180575

摘要

针对我国西南地区葡萄园中卷叶相关病毒3(grapevine leaf roll-associated virus 3,GL-RaV-3)和茎痘相关病毒(grapevine rupestris stem pitting-associated virus,GRSPaV)发生普遍的情况,在单一PCR检测的基础上,分别从引物浓度和退火温度对双重PCR体系进行优化,建立了同时检测GLRaV-3和GRSPaV的双重PCR技术.建立的双重PCR反应体系最适退火温度为56.1℃,20 μL PCR反应体系中10 μmol/L浓度的混合引物最适用量为0.1μL;该方法能够检测出GLRaV-3和GRSPaV的cDNA最低浓度分别为0.99 pg/uL和99.43 ng/μL,且特异性良好.应用该双重PCR方法检测了来自贵州凯里和遵义地区“南玉”“温克”“摩尔多瓦”葡萄品种疑似病株样品,GLRaV-3检出率为100％,部分样品检出GRSPaV.通过核苷酸序列克隆测序和对比发现,贵州检测出的GLRaV-3与美国分离株(AJ748523)相似度最高,为99.82％;贵州检测出的GRSPaV与巴西分离株(KT008370)相似度最高,为99.08％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王嘉福	贵州大学农业生物工程研究院	142	801	15.0	21.0
3	乔光	贵州大学农业生物工程研究院	26	170	8.0	12.0
7	李升	贵州大学农业生物工程研究院	17	22	3.0	4.0
13	龙天文	贵州大学农业生物工程研究院	2	0	0.0	0.0
17	李玲玉	贵州大学农业生物工程研究院	2	3	1.0	1.0