龙须菜卤代烷烃脱卤酶基因的转录及原核表达

• 作者: 吕燕 孙雪 孙鹏 徐年军 杜宇
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 地球科学
• 关键词: 龙须菜 卤代烷烃脱卤酶 转录 原核表达
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 页码范围: 2468-2475
• 页数: 8页
• 分类号: Q78|X51
• 字数: 5287字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20181011496

摘要

卤代烷烃脱卤酶(HLD)是一类能降解卤代脂肪化合物的酶,为今后将藻类HLD用于环境中卤素化合物的降解提供资料,本实验利用生物信息学、荧光定量PCR和pET28a表达系统对大型红藻龙须菜中HLD的酶学特性、转录表达和原核表达进行了研究.生物信息学分析结果显示,龙须菜中HLD基因(记为GlHLD)开放阅读框长969 bp,理论分子量约为36.33 ku,等电点约为5.53;该GlHLD序列与绳状龙须菜的一条HLD序列(PXF45553.1)完全一致,与绳状龙须菜和皱波角叉菜等红藻优先聚类.荧光定量PCR结果表明,高温下底物1,2-二氯乙烷和植物激素水杨酸可促进GlHLD基因的表达,其表达量分别为常温组的3.64、2.64和2.43倍.GlHLD与pET28a质粒构建的重组载体在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出具有脱卤酶活性的蛋白;该蛋白的最佳诱导条件为16℃、0.1 mmol/L IPTG诱导12 h,最后用镍柱对GlHLD蛋白进行了初步纯化.本研究为进一步了解藻类HLD家族及获得高纯度HLD酶奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐年军	宁波大学海洋学院	53	440	11.0	18.0
2	孙雪	宁波大学海洋学院	43	212	10.0	11.0
3	吕燕	宁波大学海洋学院	4	1	1.0	1.0
4	孙鹏	宁波大学海洋学院	2	0	0.0	0.0
5	杜宇		2	1	1.0	1.0