CsWRKY22启动子的克隆及响应柑橘溃疡病菌侵染的表达特征

• 作者: 何永睿 吴柳 彭爱红 王丽娟 谢竹 邹修平 陈善春 龙俊宏 龙琴
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柑橘溃疡病 CsWRKY22 启动子 诱导 GUS
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 677-690
• 页数: 14页
• 分类号: S666
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0815

摘要

由柑橘黄单胞杆菌致病变种 (Xanthomonas citri subsp. citri, Xcc) 引起的柑橘溃疡病严重危害着柑橘产业的健康可持续发展.前期研究表明, CsWRKY22可能是溃疡病感病基因.从'晚锦橙' (Citrus sinensis Osbeck) 中克隆了CsWRKY22的两个等位启动子pCsWRKY22-1和pCsWRKY22-2, 长度分别为1 428和1406bp.序列分析表明两个等位启动子序列一致性为91.76％.两个等位启动子含有多种参与植物防御反应和生长发育的顺式作用元件, 相同元件的数量和位置基本一致, 不同的是, 在TATA-box下游, pCsWRKY22-1含有2个22 bp长的TA-rich转录增强序列, 而pCsWRKY22-2只含有1个.构建CsWRKY22启动子控制GUS报告基因的植物表达载体pC sW RKY22::GUS, 并用农杆菌介导法转化'晚锦橙', 经GFP活性检测和PCR鉴定获得pCsWRKY22-1::GUS和pCsWRKY22-2::GUS转基因植株各8株和4株.GUS组织化学染色、GUS酶活性及定量PCR分析表明, CsWRKY22启动子具有较强的机械伤诱导活性和柑橘溃疡病病原菌诱导活性, 同时具有一定水平的基础表达特性.pCsWRKY22-1机械伤诱导活性高于pCsWRKY22-2, 而pCsWRKY22-2溃疡病菌诱导活性高于pCsWRKY22-1.