海洋氧化节杆菌KQ11右旋糖苷酶催化位点关键氨基酸

• 作者: 丁一 刘乐 吕明生 房耀维 王淑军 王紫玄
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 右旋糖苷酶 定点突变 催化域 关键氨基酸 结构预测
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 113-120
• 页数: 8页
• 分类号: Q812
• 字数: 5035字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20180305-031

摘要

通过同源比对,对来自海洋氧化节杆菌(Arthrobacter oxydans KQ 11)的右旋糖苷酶(记作AoDex)催化域及关键氨基酸进行预测,运用定点突变将AoDex催化域418-QTDGIELYKGSTMKNTFFNANDD-440中的5个氨基酸突变为甘氨酸,获得5种突变型右旋糖苷酶原核表达载体:pColdⅢ-KQN-Q418G、pColdⅢ-KQN-D420G、pColdⅢ-KQN-E423G、pColdⅢ-KQN-D439G、pColdⅢ-KQN-D440G,表达产物分别记为Q418GDex、D420GDex、E423GDex、D439GDex、D440GDex.经过发酵表达,Q418GDex、D420GDex、E423GDex、D439GDex几乎没有酶活力.D440GDex酶活力与AoDex一致;所不同的是,D440GDex在25～40℃时的酶活力提高了2～3倍,最适pH值也从AoDex的5.5变为6.5.数据表明,Q418、D420、E423、D439四个氨基酸残基是AoDex催化域中的关键氨基酸.D440突变为甘氨酸对该酶的性质有较大影响,也表明其不是催化域中的广义碱.本研究表明AoDex的催化机制与糖苷酶49家族是一致的,为AoDex的功能改造提供了理论支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕明生	淮海工学院海洋生命与水产学院	44	293	9.0	15.0
2	王淑军	淮海工学院海洋生命与水产学院	92	734	13.0	22.0
4	房耀维	淮海工学院海洋生命与水产学院	40	228	8.0	13.0
7	刘乐	淮海工学院海洋生命与水产学院	3	1	1.0	1.0
8	丁一	淮海工学院海洋生命与水产学院	3	1	1.0	1.0
9	王紫玄	淮海工学院海洋生命与水产学院	1	1	1.0	1.0