摘要:
目的 探讨富血小板血浆(PRP)联合聚乳酸/聚己内酯(PLA/PCL)对小型猪破片伤深部软组织缺损愈合的影响. 方法 采用抽签法选取2只雄性巴马小型猪(11~12个月龄,下同)制备PRP.取27只雄性巴马小型猪,于每只猪双侧后肢股部各制造1处高爆弹破片伤深部软组织缺损,按照随机数字表法分为对照组、材料组、PRP+材料组,每组9只.创面清创后,材料组、PRP+材料组猪用PLA/PCL填塞伤道,PRP+材料组同时向伤道内注入2 mL激活的PRP,3组猪均缝合皮肤全层封闭创口.记录各组猪手术时间,术后即刻测量伤道长度和体积.术后1、2、4周,每组各处死3只猪,取两侧股部伤道组织及材料组、PRP+材料组猪PLA/PCL,行伤道大体观察和材料降解情况观察.术后2、4周,取各组猪伤道组织,苏木精-伊红染色观察组织形态学变化,免疫组织化学法检测伤道组织转化生长因子β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达和血管生成.取术后1、2、4周伤道组织,实时荧光定量反转录PCR法检测伤道组织TGF-β、VEGF mRNA表达.对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析及LSD-t检验. 结果 (1)3组猪伤道长度及体积比较,差异无统计学意义(F=0.336、0.282,P>0.05).对照组猪手术时间[(30.9±2.1)min]明显短于材料组[(39.7±2.2)min]和PRP+材料组[(40.0±2.6)min,t=-11.45、-11.88,P<0.01].(2)对照组、材料组及PRP+材料组猪伤道感染数分别为10、7、5个.对照组猪术后1、2、4周伤道组织均发生感染材料组及PRP+材料组猪伤道组织均未发生感染,术后1周材料与组织易分离;术后2周部分材料与组织融合,部分材料有降解趋势;术后4周材料与组织完全融合.(3)对照组猪伤道组织术后2周有红细胞及炎性细胞浸润,术后4周仍可见坏死组织及炎性细胞浸润.材料组及PRP+材料组猪伤道组织术后2周有大量红细胞及炎性细胞浸润;术后4周,与材料组比较,PRP+材料组猪伤道组织无炎性细胞浸润.(4)术后2、4周,PRP+材料组猪伤道组织成纤维细胞(Fb)、多核巨噬细胞TGF-β蛋白表达和Fb、血管内皮细胞VEGF蛋白表达及血管形成明显多于对照组和材料组.(5)术后4周,材料组猪伤道组织TGF-β mRNA表达水平明显高于对照组(t=-3.93,P<0.01).与对照组及材料组比较,PRP+材料组猪术后1、2、4周伤道组织TGF-β mRNA表达水平均明显升高(t=9.23、13.81、11.73,-7.51、-12.04、-7.80,P<0.01).术后4周,材料组猪伤道组织VEGF mRNA表达水平明显高于对照组(t=-3.94,P<0.01).与对照组及材料组比较,PRP+材料组猪术后1、2、4周伤道组织的VEGFmRNA表达水平均明显升高(t=12.33、3.95、7.97,-11.36、-2.97、-4.04,P<0.01). 结论 PRP联合PLA/PCL可为新生组织长入提供物理支架,同时能促进创面局部TGF-β、VEGF的mRNA和蛋白表达,从而促进小型猪破片伤深部软组织缺损愈合.