IgG1型单克隆抗体对照品的一级结构解析

• 作者: 孟晓光 崔新玲 应万涛 朱涛 胡志上 钱小红
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 抗体对照品 分子量 等电点 电荷异质性 肽图
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 939-945
• 页数: 7页
• 分类号: O657
• 字数: 3991字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2019.08.007

摘要

对单克隆抗体药物对照品(IgG1型)进行了全面的结构表征.采用Exactive plus EMR质谱测定了去N糖前后抗体的精确分子量,并通过计算N糖含量得出其完整分子量为148 285.0～ 149 020.8,完整去糖后分子量为145 810.4,N糖含量为1.67％～2.15％.优化了全柱成像实时等电聚焦毛细管电泳(WCID-cIEF)检测方法,结果显示该抗体等电点分布在8.21 ～8.74之间,其中主成分等电点为8.61,相对含量为61.43％.继而使用离子交换色谱检测了电荷异质性,发现碱性峰含量为4.1％,酸性峰含量为23.9％,主峰含量为72.0％,与WCID-cIEF结果吻合,并证明了方法间良好的重现性.通过切糖前后的肽图分析,获得糖肽分布信息,识别出糖修饰位点及重轻链的互补决定区(CDR),甲硫氨酸(M)的氧化位点及氧化率,并通过抗体还原前后的肽图解析出二硫键连接.研究结果同时提示该抗体对照品无C末端糖化修饰现象.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱涛	天津科技大学生物工程学院	16	16	2.0	2.0
5	孟晓光		2	4	1.0	2.0
6	胡志上		4	1	1.0	1.0