牦牛Lkb1基因编码区克隆及其在骨骼肌的表达分析

• 作者: 字向东 李键 林亚秋 柏雪 熊显荣 熊燕 雷召雄
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牦牛 Lkb1基因 骨骼肌 表达分析 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 71-79
• 页数: 9页
• 分类号: S823
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.01.008

摘要

研究表明肝激酶b1(liver kinase b1,Lkb1)在小鼠(Mus musculus)骨骼肌发育与机体能量代谢调控中发挥重要作用.牦牛(Bos grunniens)作为青藏高原及毗邻地区的特有家畜,其骨骼肌的生长发育是影响产肉性能的主要因素之一.为研究Lkb1在牦牛骨骼肌生长发育及能量代谢中的潜在生物学功能,本研究以金川牦牛背最长肌cDNA为模板,采用PCR技术克隆LkbJ基因的CDS序列,并通过生物信息学方法,预测牦牛Lkb1氨基酸序列的理化性质、分析其在物种间的保守性;最后利用qRT-PCR技术检测Lkb1基因在成年金川牦牛不同组织中的表达模式,并且分析Lkb1基因在同龄不同品种牦牛骨骼肌的表达差异.研究结果显示,牦牛Lkb1基因的CDS序列全长为1 317 bp (GenBank登录号:MH412713),编码438个氨基酸.预测Lkb1蛋白为具有核质穿梭、发生磷酸化/去磷酸化的亲水性蛋白,可能参与调节机体能量和脂肪酸代谢.物种的保守性分析发现牦牛Lkb1基因与绵羊(Ovis aries)和山羊(Capra hircus)的同源性最高,经核苷酸和氨基酸序列比对同源性均高达97.50％和99.54％;而与小鼠核苷酸和氨基酸序列的同源性仅为45.48％和44.19％.基因表达分析显示,Lkb1基因在成年金川牦牛的骨骼肌中具有较高的表达量,在脂肪和肝脏组织中的表达量相对较低.在不同品种中,金川牦牛半腱肌Lkb1表达量显著高于麦洼牦牛(P＜0.05),由此推测,Lkb1基因可能与牦牛骨骼肌的生长和能量代谢相关.该研究结果为进一步揭示Lkb1的功能和调控机制提供参考资料.